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EB-3細(xì)胞 EB3(人淋巴樣Burkitt淋巴瘤細(xì)胞)

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更新時(shí)間:2015-11-06 16:29:30瀏覽次數(shù):221次

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EB-3細(xì)胞 [EB3](人淋巴樣Burkitt淋巴瘤細(xì)胞)細(xì)胞培養(yǎng)方法 
1、收到細(xì)胞,請(qǐng)查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請(qǐng)盡快。
2、收到細(xì)胞,如包裝完好,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái),顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請(qǐng)不要打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右,讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理
3. 收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況 ,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
4,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過(guò)的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時(shí)之需。
5 、24小時(shí)后,細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿(mǎn)瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細(xì)胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn))PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml  0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),一般1-3分鐘,不超過(guò)5分鐘??梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁,見(jiàn)細(xì)胞脫落下來(lái),加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細(xì)胞量多可一傳三,有些細(xì)胞不易傳得過(guò)稀,有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。(懸浮細(xì)胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細(xì)胞 ,懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無(wú)菌操作。換液時(shí),換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37度    5%CO2 培養(yǎng)
7.  收到細(xì)胞后,請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機(jī)與無(wú)機(jī)成分、激素、生長(zhǎng)因子與微量元素)、細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
人中期因子(MK)檢測(cè)試劑盒
人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)檢測(cè)試劑盒
人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)檢測(cè)試劑盒
人腫瘤特異生長(zhǎng)因子腫瘤相關(guān)因子(TSGF)檢測(cè)試劑盒
人色素上皮衍生因子(PEDF)檢測(cè)試劑盒
人克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)檢測(cè)試劑盒
人黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)檢測(cè)試劑盒
人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFRCD71)檢測(cè)試劑盒
人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)檢測(cè)試劑盒
人細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)檢測(cè)
人細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)檢測(cè)試劑盒
人鐵蛋白(FE)檢測(cè)試劑盒
人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)檢測(cè)試劑盒
人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)檢測(cè)試劑盒
人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)檢測(cè)試劑盒
人肺癌標(biāo)志物檢測(cè)試劑盒
人胃癌標(biāo)志物檢測(cè)試劑盒
人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2(SCCAg-2)檢測(cè)試劑盒
人胰腺癌標(biāo)志物CA242檢測(cè)試劑盒
人胃腸癌標(biāo)志物CA199檢測(cè)試劑盒
人乳腺癌標(biāo)志物-CA153檢測(cè)試劑盒
人卵巢癌標(biāo)志物CA125檢測(cè)試劑盒
人甲種胎兒球蛋白甲胎蛋白(AFP)檢測(cè)試劑盒
人癌胚抗原(CEACD66)檢測(cè)試劑盒
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)檢測(cè)試劑盒
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)檢測(cè)試劑盒
人抑瘤素M(OSM)檢測(cè)試劑盒
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)檢測(cè)試劑盒
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)檢測(cè)試劑盒
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)檢測(cè)試劑盒
人表面活性蛋白A(SP-A)檢測(cè)試劑盒
人肺炎衣原體抗體(Cpn-Ab)檢測(cè)試劑盒
人肺耐藥蛋白(LRP)檢測(cè)試劑盒
人α1抗胰糜蛋白酶(AACT)檢測(cè)試劑盒
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)檢測(cè)試劑盒
人粘蛋白粘液素7(MUC7)檢測(cè)試劑盒
人轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)檢測(cè)試劑盒
人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)檢測(cè)試劑盒
人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)檢測(cè)試劑盒
人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)檢測(cè)試劑盒
人粘蛋白粘液素5AC(MUC5AC)檢測(cè)試劑盒
人轉(zhuǎn)氨酶谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALTGPT)檢測(cè)試劑盒
人天門(mén)冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOTGPT)檢測(cè)試劑盒
人肝脂酶(HL)檢測(cè)試劑盒
人乙酰肝素酶(HPA)檢測(cè)試劑盒
人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)檢測(cè)試劑盒
人纖維連接素相關(guān)抗原(FRA)檢測(cè)試劑盒
人胃泌素細(xì)胞抗體(GCA)檢測(cè)試劑盒
EB-3細(xì)胞 [EB3](人淋巴樣Burkitt淋巴瘤細(xì)胞)人谷氨酸脫氫酶(GDHGLDH)檢測(cè)試劑盒
人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)檢測(cè)試劑盒
人膽酸(CA)檢測(cè)試劑盒
人幽門(mén)螺旋菌IgG(Hp-IgG)檢測(cè)試劑盒
人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)檢測(cè)試劑盒
人胃粘液素(GM)檢測(cè)試劑盒
人透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)檢測(cè)試劑盒
人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)檢測(cè)試劑盒
人幽門(mén)螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)檢測(cè)試劑盒
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 Jurkat, Clone E6-1
人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 U-937
人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞 Caki-2
人膜間皮細(xì)胞 MeT-5A
人胚腎細(xì)胞 293 [HEK-293]
人皮膚成纖維細(xì)胞 Hs 865.Sk
人胚腎細(xì)胞 293T
人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 CaCo-2
人食管癌細(xì)胞 KYSE-450
人食管鱗癌細(xì)胞 KYSE-150
人胰腺癌細(xì)胞 JF-305
人乳腺癌細(xì)胞 MDA-MB-468
人肝癌細(xì)胞 Hep 3B2.1-7
人肝癌細(xì)胞 HepG2
人白血病細(xì)胞 HL-60
人胃黏膜上皮細(xì)胞 GES-1
人臍靜脈融合細(xì)胞 EAhy926
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 Jurkat, Clone E6-1
人永生化表皮細(xì)胞 HaCat
人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 HEL
人前列腺癌細(xì)胞 DU145
人前列腺癌細(xì)胞 PC-3
人前列腺癌細(xì)胞 LNCAP
人肺成纖維細(xì)胞 HFL1
人肝星形細(xì)胞 LX-2
張氏肝細(xì)胞 Chang Liver
表達(dá)HBV病毒的人肝細(xì)胞 HepG2.2.15
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 HCC827
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H460
人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 SW480
人肝癌細(xì)胞 BEL-7404
人胃癌細(xì)胞 NCI-N87
人鼻咽低分化鱗癌細(xì)胞株 SUNE-1
人胚腎細(xì)胞 293[HEK-293;HEK293]
人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞 hFOB 1.19
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 BT474
人肺黏液上皮樣癌細(xì)胞 NCI-h1688改為NCI-H292

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