大鼠肝細(xì)胞瘤，H-4-II-E細(xì)胞

細(xì)胞死亡是細(xì)胞衰老的結(jié)果，是細(xì)胞生命現(xiàn)象的終止。包括急性死亡（細(xì)胞壞 死）和程序化死亡（細(xì)胞凋亡）。細(xì)胞死亡zui顯著的現(xiàn)象，是原生質(zhì)的凝固。事 實(shí)上細(xì)胞死亡是一個(gè)漸進(jìn)過(guò)程，要決定一個(gè)細(xì)胞何時(shí)已死亡是較因難的。除非用 固定液等人為因素瞬間使其死亡。細(xì)胞衰老的研究只是整個(gè)衰老生物學(xué)（老年學(xué)，人類(lèi)學(xué)）研究中的一部分。所 謂衰老生物學(xué)（biology of senescence）（或稱(chēng)老年學(xué)，gerontology）是研究 生物衰老的現(xiàn)象、過(guò)程和規(guī)律。

大鼠肝細(xì)胞瘤，H-4-II-E細(xì)胞

Colo205 人結(jié)腸癌 
Colo320DM 人結(jié)腸癌 
D341 Med 人髓母細(xì)胞瘤 
Daudi 人B淋巴細(xì)胞瘤 
DU145 人前列腺癌細(xì)胞 
G-401 人腎癌Wilms 
GLC-82 人肺腺癌細(xì)胞 
HCT116 人結(jié)直腸癌 
HCT-8 人結(jié)腸腺癌 
HEC-1B 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 
Hela 人宮頸癌細(xì)胞 
Hep G2 人肝癌細(xì)胞 
Hep-2 人喉癌細(xì)胞 
HL-60 人白血病細(xì)胞 
HOS 人骨肉瘤細(xì)胞 
HT-1080 人纖維肉瘤 
HT-29 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 
 

【研究范圍】?jī)H供科研使用

【細(xì)胞特征】每?jī)傻饺爝M(jìn)行換液。細(xì)胞應(yīng)當(dāng)在融合前傳代
【細(xì)胞培養(yǎng)表述】
一、態(tài)觀(guān)察。細(xì)胞膜是每天必須觀(guān)察的，看是否清晰，細(xì)胞的死亡往往是從細(xì)胞膜的破裂開(kāi)始的，早期的表現(xiàn)就是細(xì)胞膜某一點(diǎn)出現(xiàn)欠完整或者毛發(fā)影。
二、細(xì)胞往往會(huì)有“抱團(tuán)”現(xiàn)象，抱團(tuán)生長(zhǎng)或死亡，個(gè)人認(rèn)為應(yīng)該勤換液或傳代，盡量避免細(xì)胞抱團(tuán)。
三、長(zhǎng)迅速，強(qiáng)烈建議用較大的培養(yǎng)瓶養(yǎng)，用小瓶養(yǎng)的話(huà)，換液不及時(shí)，很容易死亡。細(xì)胞的生長(zhǎng)速度一般為2天左右就需要傳代，并且一般為一傳三，或一傳四。
四、培養(yǎng)液：1640培養(yǎng)液，1L一般加*2g，并加雙抗，胎牛血清濃度*為12%，zui低不低于10%，細(xì)胞對(duì)胎牛血清高度依賴(lài)。培養(yǎng)液PH應(yīng)調(diào)為7.20-7.40之間。
五、防污染。細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，較少發(fā)生污染，但常規(guī)措施應(yīng)該做好。比如無(wú)菌操作，酒精消毒等，培養(yǎng)瓶口建議過(guò)火，包括瓶蓋，應(yīng)過(guò)火4秒左右。
六、凍存。-20一小時(shí)，-80過(guò)夜，液氮*保存。強(qiáng)烈建議液氮*保存，盡量不要在-80*保存，死亡率很高。
七、復(fù)蘇。調(diào)節(jié)水浴箱溫度為42℃，并提前在試管內(nèi)放置10倍培養(yǎng)液，使培養(yǎng)液溫度與室溫*。1分鐘內(nèi)融化細(xì)胞（禁止搖晃凍存管），移取至試管內(nèi)，動(dòng)作要輕，從試管管底開(kāi)始慢慢上提移液管，使細(xì)胞在培養(yǎng)液內(nèi)分布均勻，離心，洗2次。