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乳酸菌套裝生化鑒定管9 種(GB4789)

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更新時間:2014-10-21 12:54:24瀏覽次數(shù):268次

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乳酸菌套裝生化鑒定管9 種(GB4789)
規(guī)格:20支/盒
用途:用于變形桿菌生化鑒定

乳酸菌套裝生化鑒定管9 種(GB4789)

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16、葡萄糖酸鹽的氧化
假單胞菌屬和腸道桿菌科的細(xì)菌,可氧化葡萄糖酸為2-酮基葡萄糖酸。葡萄糖酸無還原性基團(tuán),氧化后形成酮基,則可將斐林氏試劑的呈藍(lán)色的銅鹽還原為磚紅色的Cu2O沉淀。
試驗(yàn)方法:用pH7.2的磷酸緩沖液配制成含1%葡萄糖酸鹽(可用*或*)的溶液。分裝試管,每管2mL。刮取適溫培養(yǎng)18-24小時的菌苔至2mL的葡萄糖酸鹽溶液中制成濃的菌懸液,置30℃過夜,然后每管加入0.5mL的斐林試劑,放在沸水浴中加熱10分鐘,試管中液體由藍(lán)色變?yōu)辄S綠,綠橙色或出現(xiàn)紅色沉淀者為陽性反應(yīng),如溶液不變色者為陰性。
17、硫化氫-靛基質(zhì)-動力(SIM)瓊脂試驗(yàn)
試驗(yàn)方法:以接種針挑取菌落或純養(yǎng)物穿刺接種約1/2深度,置36±1℃培養(yǎng)18~24h,觀察結(jié)果。培養(yǎng)物呈現(xiàn)黑色為硫化氫陽性,混濁或沿穿刺線向外生長為有動力,然后加Kovacs氏試劑數(shù)滴于培養(yǎng)表面,靜置10min,若試劑呈紅色為靛基質(zhì)陽性。培養(yǎng)基未接種的下部,可作為對照。
本試驗(yàn)用于腸桿菌科細(xì)菌初步生化篩選,與三糖鐵瓊脂等聯(lián)合使用可顯著提高篩選功效。
18、β-半乳糖苷酶(ONPG)的測定
本試驗(yàn)應(yīng)用于腸肝菌科的鑒定。
測定步驟:
(1)將測定菌接種于TSI斜面上,培養(yǎng)于37℃18h(或其他zui適溫度)
(2)挑取1大環(huán)菌苔入約0.25mL的生理鹽水中制成菌懸液,每管加1滴甲苯,搖勻(有助于酶的釋放),于37℃放置5分鐘。
(3)在菌懸液中加入0.25mL的0.75mol/L ONPG,測定管置于37℃水浴培養(yǎng)。經(jīng)30分、1、2、3、……24h進(jìn)行觀察,如有黃色者則為陽性。
19、耐鹽性試驗(yàn)
本試驗(yàn)是觀察滲透壓對細(xì)菌生長的影響。由于不同菌類耐鹽性不同,故常以此作為鑒別特征。一般可根據(jù)不同種類的菌株,選擇其適合生長的培養(yǎng)基,在其中加入不同量的NaCl,接種后觀察其生長與否,以判斷其耐鹽性。
以肉湯培養(yǎng)液根據(jù)鑒定需要,配成不同濃度的NaCl,如2%、3.5%、5%、7%、10%等。培養(yǎng)基要求十分澄清,接種時應(yīng)采用幼齡菌液,直針接種,適溫培養(yǎng)3-7d,與未接種的對照管對比,目測生長情況。
20、*酶的測定
菌體如存在有*酶,就能使*分解生成脂肪和水溶性的磷酸*。
接種與觀察結(jié)果:將測試菌的菌液,環(huán)接在有卵黃的試管和不加卵黃的對照管中,適溫培養(yǎng)1、3或5天觀察。假若與對照管相比較,在卵黃胰胨液中或表面,形成白色沉淀者,則為陽性反應(yīng),表示*被分解,生成脂肪和水溶性的磷酸*,說明有卵磷酶的存在。
另一種方法:
以無菌操作取出卵黃,放入滅菌的三角瓶中,加相當(dāng)于等量的生理鹽水搖勻后,取10mL卵黃液加入到溶化的約50-55℃的200mL肉汁胨瓊脂培養(yǎng)基中,混合均勻后倒入培養(yǎng)皿,制成卵黃平板,過夜后即可使用。
接種與觀察結(jié)果:將測試菌點(diǎn)接在卵黃平板上,每皿可分散點(diǎn)接4-5株菌、(芽孢桿菌以點(diǎn)接1-2株菌為宜)以不影響結(jié)果觀察為度,如測試厭氧菌,則須在上面加蓋無菌的蓋玻片。每株菌至少重復(fù)點(diǎn)接兩皿。適溫培養(yǎng)1-2d觀察,在菌落周圍形成乳白色混濁環(huán),表示*被分解,生成脂肪,說明該菌株有*酶存在。

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