【產(chǎn)品名稱】:人組織蛋白去乙?;?HD)elisa試劑盒
【中文名稱】:Human Histone Deacetylase,HD elisa Kit
【檢測種屬】:人等動植物。
【產(chǎn)品用途】:被測樣品定性或定量分析
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)
【檢測方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
【保存條件】:2-8℃
【供 貨 期】:1-3天(現(xiàn)貨供應)
【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝
【服務(wù)優(yōu)勢】:全程提供ELISA實驗技術(shù)指導和ELISA試劑盒免費代測
【樣本儲存】:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加*。
人組織蛋白去乙?;?HD)elisa試劑盒
試驗所需自備物品:
1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10μl, 2-20μl, 20-200μl, 200-1000μl
3. 37℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙
檢測前準備工作:
1. 請?zhí)崆?/span>20分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。
2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應為室溫。
3. 標準品: 加入標準品&標本稀釋液1.0ml至凍干標準品中,靜置10分鐘,待其充分溶解后,輕輕混勻(濃度為5000 pg/ml)。然后根據(jù)需要進行倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)。建議配制成以下濃度: 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。樣品稀釋液直接作為空白孔 0 pg/ml。如配制2500pg/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml )5000pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的EP管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
4. *化抗體工作液:實驗前計算當次實驗所需用量(以100μl/孔計),實際配制時應多配制100-200μl。使用前15分鐘,以*化抗體稀釋液稀釋濃縮*化抗體(1:100)成工作濃度。當日使用。
5. 酶結(jié)合物工作液:實驗前計算當次實驗所需用量(以100μl/孔計),實際配制時應多配制 100-200μl。使用前15分鐘,以*化抗體稀釋液稀釋濃縮*化抗體(1:100)成工作濃度。當日使用。
人組織蛋白去乙?;?HD)elisa試劑盒
洗滌方法:
1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,設(shè)置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
本公司專業(yè)經(jīng)銷人組織蛋白去乙?;?HD)elisa試劑盒*為全國科研機構(gòu)、高校和科研人員提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品,在保證產(chǎn)品質(zhì)量的同時,我們還配有扎實的售后技術(shù)咨詢和服務(wù),咨詢。