豚鼠血清一氧化氮elisa試劑盒酶免分析步驟:
1實驗準(zhǔn)備
1).預(yù)*行編號,標(biāo)記標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置,*進(jìn)行雙孔檢測(每次實驗都須做標(biāo)準(zhǔn)曲線);
2).使用前將所有試劑回升至室溫,取所需數(shù)量的微孔條,將多余板條用試劑盒提供的自封袋重新密封同時排除里面空氣,并立即放回2-8℃干燥保存。
2分析步驟
1).在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入50?l各標(biāo)準(zhǔn)品溶液,在各樣品孔中加入50?l樣品溶液;
2).在所有孔中加入50?l的嘔吐毒素酶標(biāo)記物溶液,輕微晃動反應(yīng)板使之*混勻,室溫下(20-25℃)溫浴40min;
3).甩干孔中液體,用洗滌工作液(250ul/孔)洗滌微孔板4-5次,zui后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以*除去孔中液體;
4).洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個微孔中先加入50?l底物液A,再加 50?l底物液B,輕微晃動使之混勻;
5).室溫下(20-25℃)溫浴15min(若顏色較淺可適當(dāng)延長至20min),每孔中加入50?l終止液,混勻,在450nm下檢測吸光度,結(jié)果在5min內(nèi)讀取。
豚鼠血清一氧化氮elisa試劑盒結(jié)果計算:
*使用快靈Log/Logit計算程序?qū)z測結(jié)果進(jìn)行計算,將檢測OD均值和標(biāo)準(zhǔn)品濃度輸入,即可自動獲得檢測結(jié)果,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品種嘔吐毒素濃度。
其他參數(shù):
1.本試劑盒檢測下限為 20ppb
2.B0 吸光度值應(yīng)大于 0.8,小于 0.8 認(rèn)為試劑已變質(zhì)不可用
3.試劑盒吸光度板內(nèi)誤差小于 8%,板間誤差小于 15%
5.用本說明書提供的樣本提取方法回收率為 95%±15%
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