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上海紀(jì)寧實業(yè)有限公司

紀(jì)寧生物:ELISA實驗標(biāo)本易出的七大問題,知多少?

時間:2022-5-18閱讀:798
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在ELISA實驗檢測過程中,標(biāo)本質(zhì)量可以說是重要的關(guān)鍵因素,如果實驗標(biāo)本質(zhì)量不過關(guān),即使您的實驗操作技術(shù)再膩害也無濟于事。


大家來看看在ELISA實驗中,標(biāo)本都容易出現(xiàn)的七大問題及解決辦法:          

1.凝血不充分:

此類錯誤主要是抗凝血中存在小凝塊,多發(fā)生在血常規(guī)檢測中,為采血后標(biāo)本沒有充分顛倒混勻所致;另外,標(biāo)本量過多,由于抗凝劑的相對不足,血漿中出現(xiàn)微血凝塊的可能性增加,微血凝塊除易阻塞檢測儀器外,由于血液內(nèi)部分成分的消耗而影響檢測結(jié)果,一份只有仔細(xì)檢查才能發(fā)現(xiàn)小凝塊的標(biāo)本,可以使血小板降低30%甚至更多,紅細(xì)胞、白細(xì)胞計數(shù)也可以降低10%左右,我們規(guī)定,對用于血常規(guī)的標(biāo)本均輕輕顛倒并仔細(xì)觀察,絕大部分可以檢查出。


2.抗凝劑與血液比例不正確:

在凝血功能測定中,常有一些標(biāo)本量明顯不足,特別是兒童和入院檢查病人標(biāo)本,由于小孩采血難,入院時需檢查項目多,易發(fā)生抽血量不足,使PT、KPTT和TT假性延長,將誤導(dǎo)臨床診治,因此,血液未到刻度的標(biāo)本一律退回重抽。


3.標(biāo)本溶血:

許多指標(biāo)在紅細(xì)胞內(nèi)和血清(血漿)明顯不同,溶血可使LDH、HBDH、血K+、AST 、ALT或等值異常升高,此類錯誤是采血時的一些不良習(xí)慣造成,如:壓脈時間過長,采血不順利、抽血速度太快、血液注入容器時未取下針頭或用力過猛、等均可造成溶血,我們作過實驗,選擇20位體格檢查者,用兩種方法進行比較:⑴用注射器抽血后不去除針頭直接將針頭插入真空采血管,這時在真空管負(fù)壓作用下針管內(nèi)的血液被吸入;⑵用注射器抽血后先除去針頭,然后打開真空采血管蓋子緩緩注入標(biāo)本,兩種采血方法的標(biāo)本同時作部分生化項目檢測,結(jié)果是:前者比后者LDH上升23.4%-58.2%,平均33.7%;HBDH上升22.5%-61.4%,平均35.4%;AST上升6.7%-31.6%,平均13.7%;ALT上升4.7%-18.2%,平均11.4%;血K+上升23.7%-71.2%,平均36.1%,其它如TP、GGT和UREA等也有或多或少的變化,因此,我們主張用真空采血系統(tǒng)自然流出的標(biāo)本為宜,如果必須用注射器抽血,抽血后要取下針頭,再緩緩將血液注入標(biāo)本采集管,對于未用真空采血系統(tǒng)的單位,若注射器和針頭連接不緊,采血時有空氣進入或產(chǎn)生泡沫,使用劣質(zhì)采血器,標(biāo)本收集管沒有干燥均易造成溶血。


4.采血部位不當(dāng):

有些病人需多次檢查,或輸液時間較長,有的護士會在病人輸液更換瓶子時放出一些血液送檢,即使先去除前面的10ml血液,結(jié)果也有明顯變化,如一例輸脂肪乳后直接從輸液的靜脈中采血,導(dǎo)致了許多結(jié)果錯誤,影響前三位的是:TG為12.4mmol/L(平時為1.0 mmol/L左右),血小板達560×109/L(上升了4倍多),總蛋白濃度從60左右上升到91.6(g/L),其它常有明顯影響的有血糖、血電解質(zhì)等項目,雖臨床也知道正確的采血方法,但由于護理人員流動性大,工作量超負(fù)荷,不時有此類標(biāo)本送檢,只有反復(fù)與臨床溝通、宣傳,加上對標(biāo)本審核,對于血細(xì)胞比例明顯不對,結(jié)果不合理或有異常變化,及時與臨床聯(lián)系,減少不合格報告發(fā)出。


5.采血量不足:

對于血培養(yǎng)而言,采血過少可降低培養(yǎng)的陽性率,有文獻報告,當(dāng)培養(yǎng)的血量從2ml增加至20ml時,血培養(yǎng)的陽性率增加30%—50%,培養(yǎng)血量每增加1ml,陽性率增加3%—5%,由于標(biāo)本已經(jīng)注入培養(yǎng)瓶,不能檢查是否符合要求,只有加強溝通交流,共同努力提高檢驗質(zhì)量。


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6.標(biāo)本采集時間不當(dāng):

對細(xì)菌培養(yǎng)、激素檢查、找瘧原蟲或絲蟲病原體,需在特定的時間,以提高陽性率。


7.標(biāo)本運送和處理不及時:

標(biāo)本的運送雖不屬采集范疇,但標(biāo)本采集再規(guī)范,若不能及時送檢,將嚴(yán)重影響檢驗質(zhì)量,尿常規(guī)標(biāo)本需在二小時內(nèi)檢測完成,否則細(xì)胞等有形成分開始破壞,離體過長的標(biāo)本作血細(xì)胞分析時會影響分類結(jié)果,生化檢測的標(biāo)本也因為細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)交換而變化,我們要求標(biāo)本及時送檢,到檢驗中心的標(biāo)本盡快測定,不能及時測定的生化、免疫等標(biāo)本及時分離血清,加蓋并置4℃冷藏。


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