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人ELISA試劑盒的特點(diǎn)是利用固相載體作為分離游離和結(jié)合的酶結(jié)合物的手段。人ELISA試劑盒固相載體與吸附在其上的抗原會(huì)抗體形成固相抗原或固相抗體,即免疫吸附劑(Immu-nosorbent)。通常所用的固相載體聚苯乙烯其表面主要是疏水基團(tuán),通過疏水鍵與蛋白質(zhì)結(jié)合。
之中吸附式物理性的非特異性吸附,雖然蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等對(duì)吸附的量有一定的影響,但總的來說各種蛋白質(zhì)均能吸附在聚苯乙烯載體的表面。因此除在包被時(shí)有目的地使抗原或抗體吸附在載體上,在人ELISA試劑盒各個(gè)步驟中均有可能發(fā)生干擾物質(zhì)的吸附,使zui終產(chǎn)生與受檢抗原-抗體反應(yīng)無關(guān)的顯色,這是形成本底的主要原因。
人ELISA試劑盒酶免疫測(cè)定方法的基本原理是:先將已知的抗體或抗原結(jié)合在某種固形載體上,并保持其免疫活性。測(cè)定時(shí),將待人ELISA試劑盒標(biāo)本和酶標(biāo)抗原或抗體按不同步驟與固相載體表面吸附的抗原或抗體發(fā)生反應(yīng)。用洗滌的方法分離抗原抗體復(fù)合物和游離成分。然后加入底物顯色,根據(jù)顏色深淺進(jìn)行定性或定量測(cè)定。
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