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ELISA試劑盒行將已知的抗原或抗體吸附在固相載體外表,使酶符號(hào)的抗原抗體反響在固相外表進(jìn)行的技能。該技能
可用于檢測(cè)大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、活絡(luò)、簡(jiǎn)潔、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)中血清
的詳細(xì)處理保存意見(jiàn):
(1)要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有相似過(guò)氧化物的活性,因而,在以HRP為符號(hào)酶的
ELISA測(cè)定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡(jiǎn)單在溫育過(guò)程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP
底物反響顯色。
(2)ELISA試劑盒標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所形成的的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉淀后取上清檢測(cè)。
(3)ELISA試劑盒樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的成長(zhǎng),其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)
抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作符號(hào)的測(cè)定
辦法發(fā)生非特異性干擾。
(4)血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作別離,則能夠在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保
存,應(yīng)在-70℃以下。
(5)冰凍保存的血清標(biāo)本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋
白等分子發(fā)生損壞效果,然后引起假陰性成果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留意,不要進(jìn)行劇烈振動(dòng),重復(fù)倒置混
勻即可。
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