根據(jù)我公司進(jìn)口ELISA試劑盒實驗技術(shù)部多年的經(jīng)驗以及客戶們的咨詢問題總結(jié)，整理分析出了幾個需要嚴(yán)格注意的方面，實驗者們隨上海恒遠(yuǎn)來看一看吧（供參考）。

 1. 讀板時板底不清潔：難免洗板后板底有水漬，這也可能導(dǎo)致讀數(shù)不準(zhǔn)。

 2. 溫育溫度的選擇

說明書表明的溫度可有兩種（①37℃下1小時、②43℃下45分鐘），從免疫測定的抗原抗體反應(yīng)的本質(zhì)來看，在較低的溫度下反應(yīng)較長的時間zui為*。上海恒遠(yuǎn)生物建議在臨床ELISA試劑盒測定中盡量使用較低溫育溫度較長反應(yīng)時間的條件。

 3. 采用手工洗板，孔與孔之間液體交叉：曾用洗瓶直接沖洗板。后來雖然也用槍逐孔洗板，但對此注意不夠。

 4. 加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡：終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。

 5. 加樣板過多、加樣速度慢，造成各孔反應(yīng)時間不均一：但溫度高時，加樣時間過長將導(dǎo)致各孔時間的反應(yīng)時間不均一；還使得孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。如果連續(xù)做好幾塊板，則有可能使某些板不能及時洗板，也導(dǎo)致孵育時間人為延長。