蔗糖系列_中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒_微量法
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
注 意 :正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)適 pH,將高等植物Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。
NI主要存在于細胞質(zhì)中,負責(zé)分解細胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖。
蔗糖系列_中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒_微量法
測定原理:
NI催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖,進一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計算NI活性
自備用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入10mL試劑一充分溶解備用;用不完的試劑4℃保存;
試劑三:液體15mL×1瓶,4℃保存;
粗酶液提?。?br/>
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。12000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。