氧化型GSSG含量測(cè)試盒谷胱系列＿分光光度法
測(cè)定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
GSH/GSSG是細(xì)胞內(nèi)重要的氧化還原對(duì)之一。因此，測(cè)定細(xì)胞內(nèi)GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值，能夠很好地反映細(xì)胞所處的氧化還原狀態(tài)，也是(GSSG)氧化還原循環(huán)的主要指標(biāo)之一。
測(cè)定原理：
利用2-VP法測(cè)GSSG含量。
自備儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配置：
試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體300μL×1支，4℃保存。
試劑三：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：液體6mL×1瓶，4℃保存。
試劑五： 液體30μL×1瓶，-20℃保存。臨用前加入0.6 mL試劑三稀釋?zhuān)?℃保存。
試劑六：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入40 mL試劑三溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用。
氧化型GSSG含量測(cè)試盒谷胱系列＿分光光度法
粗酶液提?。?/p>
1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清液（如上清不清澈，再離心3min）待測(cè)。
2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；8000g 4℃離心10min，取上清液（如上清不清澈，再離心3min）的蒸餾水混勻待測(cè)。
3. 血清等液體：直接測(cè)定。
測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到412 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于25℃（一般物種）或者37℃（哺乳動(dòng)物）水浴中保溫30min。
3. 測(cè)定管：取1 mL EP管，加入100 μ L上清液，5μ L試劑二，蓋緊后混勻，置于37℃水浴30min；依次加入100 μ L試劑四，10 μ L試劑五，700 μ L試劑六，迅速混勻后，立即測(cè)定30 s和150 s光吸收A1和A2，計(jì)算ΔA=A2-A1。
環(huán)保在線