還原糖含量測(cè)試盒_糖代謝系列
測(cè)定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
注 意 ：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
還原糖廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。植物體內(nèi)的還原糖主要包括葡萄糖、果糖和麥芽糖等，是常見的單糖和雙糖，其中葡萄糖和果糖不僅是呼吸作用的主要底物，也是進(jìn)一步合成蔗糖、淀粉和纖維素的底物。
還原糖含量測(cè)試盒_糖代謝系列
測(cè)定原理：
加熱促進(jìn)堿性溶液中3,5-二硝基水楊酸溶液與還原糖生成棕紅色氨基化合物，在540nm有特征吸收峰；在一定的濃度范圍內(nèi)，還原糖含量與540nm吸光度成線性關(guān)系，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可求出樣品中還原糖的量。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、蒸餾水。
試劑的組成和配制：
試劑一：100mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：15mL×1瓶 ，4℃保存；
樣品中還原糖的提取：
1、細(xì)菌或細(xì)胞的處理：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議1000萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入2mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3S，間隔10S，重復(fù)30次），轉(zhuǎn)移到有蓋離心管中（防止加熱時(shí)水分散失），80℃水浴中40min并且振蕩8~10次，8000g，25℃離心10min，取上清供測(cè)定用。
2、組織的處理：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.2g組織，加入2mL試劑一），冰浴勻漿，轉(zhuǎn)移到有蓋離心管中（防止加熱時(shí)水分散失），80℃水浴中40min并且振蕩8~10次，8000g，25℃離心10min，取上清供測(cè)定用。
3、血清（漿）的處理：按照血清（漿）體積（mL）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議取0.2mL血清（漿）加入2mL試劑一），冰浴勻漿，轉(zhuǎn)移到有蓋離心管中（防止加熱時(shí)水分散失），80℃水浴中40min并且振蕩8~10次，8000g，25℃離心10min，取上清供測(cè)定用。
測(cè)定步驟：
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm，蒸餾水調(diào)零。
2、調(diào)節(jié)水浴鍋至95℃。
環(huán)保在線