P450系列_苯胺4羥化酶(AH)測試盒
測定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
注 意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義：
細(xì)胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的同工酶，在外源物質(zhì)代謝中具有重要作用，尤其是藥物和毒物的代謝。AH在P450酶系中相當(dāng)于CYP2E1亞型，CYP2E1不僅參與了藥物的代謝，而且還能催化多種前致癌物和前毒物的活化過程。
測定原理：
AH催化苯胺羥化后產(chǎn)生的4-氨基酚，進(jìn)一步轉(zhuǎn)變?yōu)榉?吲哚復(fù)合物，在630nm處有特征吸收峰；通過測定630nm吸光度增加速率，來計算AH活性。
P450系列_苯胺4羥化酶(AH)測試盒
自備儀器及用品：
普通離心機(jī)、超速離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、雙蒸水和冰。
試劑組成和配制：
試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入100mL蒸餾水，充分溶解。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入10mL蒸餾水，充分溶解。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入5mL蒸餾水，充分溶解。
試劑五：液體×1瓶，4℃保存。
試劑六：粉劑×1瓶（腐蝕性試劑），4℃避光保存。臨用前加入10mL蒸餾水，充分溶解。
試劑七：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入10mL蒸餾水充分溶解。
標(biāo)準(zhǔn)液：液體×1瓶，10μmol/L，4℃避光保存。
粗酶液提取：
1、除去細(xì)胞核，線粒體等大分子物質(zhì)：稱約0.5g組織，加入1mL試劑一，冰上充分研磨，10 000g 4℃，離心30min，取上清液，轉(zhuǎn)移到超速離心管中。
2、粗制微粒體： 100 000g 4℃，離心60min，棄上清液。
3、除血紅蛋白等雜質(zhì)：向步驟2的沉淀中加1mL試劑一，蓋緊后充分震蕩溶解，100 000g離心30min，棄上清液。
4、終微粒體：向步驟3的沉淀中加試劑二0.5mL，蓋緊后充分震蕩溶解，即粗酶液，待測。
環(huán)保在線