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脂肪酸代謝系列_磷脂酶D(PLD)測試盒_微量法

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)100管/96樣

品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所在地上海市

更新時(shí)間:2022-07-27 10:20:08瀏覽次數(shù):477次

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品牌 紀(jì)寧生物 貨期 現(xiàn)貨供應(yīng)
有效期 6個(gè)月 用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)使用
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脂肪酸代謝系列_磷脂酶D(PLD)測試盒_微量法

測定方法:微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣

注   意 :正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義:

磷脂酶D(EC3.1.4.4)即磷脂酰水解酶,是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應(yīng)的一類酶的總稱,廣泛存在于高等動(dòng)植物和細(xì)菌等多種生物體中,具有參與細(xì)胞脂質(zhì)代謝、信號(hào)傳導(dǎo)、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。

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測定原理:

磷脂酶D催化水解磷脂酰末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸,在氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過氧化氫,過氧化氫在過氧化氫酶的作用下將4-氨基和重蒸酚氧化成粉紅色物質(zhì),在500nm處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、無水乙醇。

試劑組成和配制:

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體102mL×瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體3mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:粉劑×1支,-20℃避光保存。臨用前加1mL無水乙醇充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

試劑四:液體15mL×1瓶,4℃避光保存。

標(biāo)準(zhǔn)品:液體1mL×1支,4℃避光保存。

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酶液提取:

1.組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心5min,取全部上清于4℃、100000g離心30min,棄上清,取沉淀溶于1mL試劑一。

2.細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后于4℃,10000g離心5min,取全部上清于4℃、100000g離心30min,棄上清,取沉淀溶于1mL試劑一。

3.血清:直接測定。


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