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ELISA試劑盒法測定尿微量白蛋白研究

閱讀:465發(fā)布時間:2014-12-5

    目前,已出現(xiàn)多種檢測尿中微量白蛋白的方法,如化學(xué)發(fā)光法、放射免疫法、試條半定量法、免疫比濁法等。因此,本文主要探討ELISA試劑盒法檢測尿微量白蛋白的優(yōu)缺點(diǎn)?;瘜W(xué)發(fā)光法雖具有高靈敏度、高準(zhǔn)確度、高精密度、寬線性、反應(yīng)快速,ELISA試劑盒影響因素少,結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn),但化學(xué)發(fā)光法的缺點(diǎn)是儀器、試劑成本高,給患者帶來的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)相對較重。

在處理和保存方面要考慮以下幾個方面:
    (1)要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。
    (2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。
    (3)血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,ELISA試劑盒則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應(yīng)在-70℃以下。
    (4)冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。
    (5)標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。
至今我們擁有了一支由銷售、技術(shù)服務(wù)、化學(xué)市等人員構(gòu)成的ELISA試劑盒精英團(tuán)隊(duì),隨時為客戶提供zui的服務(wù)!近年來許多研究表明尿微量白蛋白不僅是糖尿病腎病的預(yù)測指標(biāo),也是心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[7],所以檢測尿微量白蛋白有重要的臨床價(jià)值。本文分別用ELISA試劑盒法和化學(xué)發(fā)光法測定尿微量白蛋白濃度,對其結(jié)果進(jìn)行比較,并比較其優(yōu)缺點(diǎn),從而評價(jià)ELISA試劑盒法的臨床適用性。
    微量白蛋白尿的臨床應(yīng)用廣泛,微量白蛋白尿是反映腎臟疾病和損傷的一個非常靈敏的指標(biāo),在預(yù)示糖尿病、腎病方面已使用多年。近年有資料顯示,微量白蛋白尿也是非糖尿病患者心血管疾病發(fā)病的一個危險(xiǎn)因子,受到廣泛重視。
 


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