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閱讀:674發(fā)布時(shí)間:2015-2-6
前言:后日便是春季的開始了,在新春的到來之前,我公司新品ELISA試劑盒系列中的二抗現(xiàn)貨到倉(cāng)了!上周末期間,我公司技術(shù)員特別整理出相關(guān)技術(shù)內(nèi)容,下面我們就倆看看今天的主要內(nèi)容:
什么是抗體?
它是高等動(dòng)物在抗原物質(zhì)的刺激下由漿細(xì)胞產(chǎn)生的一類能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。
什么是二抗?
二抗是在其它宿主體內(nèi)制備的能與一抗或一抗片段結(jié)合的抗體,ELISA試劑盒上面通常連有酶或熒光素等標(biāo)簽。由于二抗所具備的優(yōu)點(diǎn)使得其在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中得以應(yīng)用廣泛ELISA試劑盒、免疫組織化學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)、免疫沉淀。
·二抗的選擇
1. 一抗的物種來源:一抗是在什么物種來源的,相應(yīng)的二抗也要是抗該物種的抗體。
2. 一抗是屬于哪個(gè)類或亞類:二抗需與一抗的類別或亞類相匹配,這通常是針對(duì)單克隆抗體而言。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白,因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體。
3. 選用耦聯(lián)有哪種探針的二抗?選用哪種探針的二抗主要取決于具體的實(shí)驗(yàn)。對(duì)于和ELISA試劑盒,zui常用的二抗是酶標(biāo)二抗,而細(xì)胞或組織標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中通常使用熒光基團(tuán)標(biāo)記的二抗,免疫組化中也可以使用辣根過氧化酶或堿性磷酸酶標(biāo)記的二抗。如果想要更大程度的放大檢測(cè)信號(hào)。
通常情況下,一抗可以在山羊、小鼠、兔子、大鼠及綿羊體內(nèi)制備,其中屬小鼠及兔子zui為常見,相應(yīng)的,二抗的種屬也應(yīng)當(dāng)與一抗的相一致。而對(duì)于制備二抗的宿主,則應(yīng)選擇另外一種不同的動(dòng)物,一般選用驢、山羊、兔子、綿羊或其他較大的動(dòng)物,可以實(shí)現(xiàn)二抗的大規(guī)模制備,其中又屬山羊使用zui多。
二抗針對(duì)某一特定物種的所有抗體均具有特異性,因而使用標(biāo)記的二抗可以免去對(duì)每一個(gè)一抗進(jìn)行標(biāo)記,大大節(jié)省了時(shí)間和費(fèi)用;此外,一個(gè)一抗分子可以同時(shí)結(jié)合幾個(gè)二抗分子,從而使信號(hào)大大增強(qiáng),提高了實(shí)驗(yàn)靈敏度。
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