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ELISA檢測試劑盒標本一般都要進行稀釋

閱讀:175發(fā)布時間:2015-3-16

     如果加樣不準就會造成誤差,尤其當稀釋倍數大時,很小的誤差,會導致較大的相對誤差,使陰性(或弱陽性)標本呈陽性(或陰性)。加樣時應將所加物加在ELISA檢測試劑盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產生氣泡。目前,大部分血站都已使用全自動酶免加樣系統(tǒng)處理標本,可較好地避免以上誤差。

 1、2包被物的純度。在酶聯免疫測定尤其是間接ELISA中,ELISA檢測試劑盒的特異性取決于使用抗原的純度。目前由于技術條件的限制,包被用抗原或抗體的純度不可能達到*,所以有些非特異性顯色不可避免,只能盡可能提高純度,提高特異性。目前使用的包被抗原一般為合成多肽抗原。 
1、3包被抗體的效價。具有高親和力和高特異性的包被抗體,是決定試劑特異性的重要方面。 
1、4 封閉。是ELISA檢測試劑盒中重要的一步,目的是封閉固相載體表面尚未被所占據的空隙[2],減少后續(xù)步驟中非特異性蛋白的干擾。 
    檢驗標本中含有酶標記物的干擾物 
1內源性干擾物:類風濕因子(RF)、黃疸等,類風濕因子是可作用于多種動物以及人IgGFc段的自身抗體,多數為IgM類,ELISA檢測試劑盒能充當抗原成分與固相及酶標抗體反應,從而呈現非特異性顯色。 
黃疸血標本中常含有內源性過氧化物酶,如用辣根過氧化物酶為標記物,就有可能產生非特異性顯色。 


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