人類原態(tài)胚胎干細胞無需轉(zhuǎn)基因就能逃避分化，通過OCT4，KLF4，KLF2三種因子的表達可以維持其天然狀態(tài)。研究人員利用ELISA試劑盒兩種生成非轉(zhuǎn)基因原態(tài)人類胚胎干細胞（hESCs）的方法路徑。他們在加入初始培養(yǎng)基之前，首先令后致敏狀態(tài)（later primed state）的人類胚胎干細胞接觸組蛋白去乙酰酶抑制劑，這樣初始培養(yǎng)條件下的八細胞胚胎就能直接建立一種新細胞系。
ELISA試劑盒操作注意事項
1、試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。人ELISA試劑盒稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
2、實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4、使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6、洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
7、底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8、加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9、按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
ELISA試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。人ELISA試劑盒樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
