ELISA試劑盒由于細(xì)菌感染而致病的各種標(biāo)本及帶菌者所需檢查的各種標(biāo)本，往往并非單一的細(xì)菌，而混有其它非致病菌（人體正常菌群）。因此當(dāng)對(duì)此標(biāo)本須作出細(xì)菌鑒定時(shí)，就必須從標(biāo)本中分離出致病菌，稱為細(xì)菌分離培養(yǎng)技術(shù)。另外，對(duì)已得到可疑病菌進(jìn)行細(xì)菌鑒定及菌種保存等培養(yǎng)，稱為純培養(yǎng)接種技術(shù)。
（一）平板劃線接種法（又稱分離培養(yǎng)法）
平板劃線接種法為zui常用的分離培養(yǎng)細(xì)菌的方法，通過(guò)平板劃線后，可使細(xì)菌分散生長(zhǎng)，形成單個(gè)菌落，有利于從含有多種細(xì)菌的標(biāo)本中分離出目的菌。平板分離劃線的方法較多，其中以分區(qū)劃線法與曲線劃線法較為常用。其目的都要使細(xì)菌呈現(xiàn)單個(gè)菌落生長(zhǎng)，便于同雜菌菌落鑒別?，F(xiàn)只介紹分區(qū)劃線法。
1、ELISA試劑盒右手持接種環(huán)，經(jīng)火焰滅菌，待涼后，挑取大腸桿菌（或葡萄球菌）培養(yǎng)物少許。
2、左手斜持瓊脂平板，皿蓋留在桌上，于火焰近處將菌涂于瓊脂平板上端，來(lái)回劃線，涂成薄膜（約占平板總表面積的1/10），劃線時(shí)接種環(huán)與平板表面成30~40º角，輕輕接觸，以腕力在平板表面行輕快地滑移動(dòng)作，接種環(huán)不應(yīng)劃破培養(yǎng)基表面。
3、燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留細(xì)菌，待冷（是否冷卻，可先在培養(yǎng)基邊緣處試觸，若瓊脂溶化，表示未涼，稍等再試），從薄膜處取菌作連續(xù)平行劃線，約占平板表面1/5左右，再次燒灼接種環(huán)，等三次平行劃線……以同樣方法作第四次，第五次劃線，將平板表面劃完。
4、ELISA試劑盒劃線完畢，蓋上平皿蓋，底面向上，用標(biāo)簽或臘筆注明菌名檢驗(yàn)號(hào)碼，接種者信息等，置37℃孵育培養(yǎng)24小時(shí)后觀察結(jié)果。
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