在實(shí)際工作當(dāng)中有很多要素影響著免疫組化的成果，包括技能人員是不是嫻熟掌握悉數(shù)試驗(yàn)的操作程序、抗體的特異性、辦法的靈敏性、標(biāo)本的固定、安排的處理、是不是進(jìn)行抗原批改、批改液的PH值等等要素。為了讓每個試驗(yàn)室能夠繼續(xù)穩(wěn)定地完成牢靠的試驗(yàn)染色成果，應(yīng)當(dāng)將免疫組化染色技能中的悉數(shù)流程納入標(biāo)準(zhǔn)化。雖然免疫組化在很多試驗(yàn)室中已慣例開展，但它是一個多過程、多要素決定的一種試驗(yàn)辦法，由于各試驗(yàn)室選用的批改辦法、染色辦法、試劑廠家、抗體克隆號、檢查體系等有所不一樣，染色成果會呈現(xiàn)較大差異，適當(dāng)部分的試驗(yàn)室對免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化的知道尚欠足夠注重, 致使不良的染色成果對病理確診致使誤導(dǎo)，因而免疫組化染色成果的牢靠性受到了*的重視。
一、 免疫組化成功的要素
病理科醫(yī)師要有適當(dāng)?shù)拿庖呓M化確診常識和免疫組化技能經(jīng)驗(yàn)，要明白知道免疫組化技能是一門試驗(yàn)性、技能性十分強(qiáng)的技能，要多了解多種抗體在安排中的表達(dá)情況，以及影響免疫組化成果的各種要素，只要進(jìn)步醫(yī)師的免疫組化確診水平才干防止過錯的判別，才干確保免疫組化確診的準(zhǔn)確性。病理技能人員是免疫組化試驗(yàn)成功的關(guān)鍵要素，操作人員要有豐厚的免疫組化的理論常識及嫻熟的免疫組化染色技能，十分明白每一個過程的使用原理，使試驗(yàn)成果更具牢靠性。牢靠的試驗(yàn)試劑和試驗(yàn)辦法是每個試驗(yàn)室的*條件。由于試驗(yàn)辦法多種多樣，抗體的品種繁多，每個試驗(yàn)室都應(yīng)當(dāng)確保高質(zhì)量價的試劑，并摸索出的試驗(yàn)條件。優(yōu)異的免疫組化取決于有用的抗原批改、靈敏的檢查體系、適宜的試驗(yàn)質(zhì)控對照及嫻熟和有責(zé)任心的技能人員。
二、免疫組化染色前處理技能操作標(biāo)準(zhǔn)
1．選材：抱負(fù)的選材厚度是0.2cm～0.3cm，大多數(shù)試驗(yàn)室都以為安排在加熱抗原批改過程中構(gòu)成脫片的首要原因是選材過厚或脫水浸蠟處理不當(dāng)所構(gòu)成的。杰出的選材、固定、脫水過程是免疫組化質(zhì)控的條件，假如H&E切片都做不出滿足的染色成果，那么免疫組化染色也將無從談起，底子無法確保染色質(zhì)量。
2．固定：在很多的安排固定液中（如甲醛、乙醇、戊二醛、多聚甲醛 等），不一樣的試驗(yàn)辦法在使用上各有千秋。但在堅(jiān)持安排細(xì)胞構(gòu)造的完整性、抗原可測定性、安排滲透性以及試劑的報(bào)價上，福爾馬林是、既經(jīng)濟(jì)又通用。而含酸或含汞的固定液對抗原保留均不抱負(fù)。安排離體后固定通常不要超過30分鐘，在常溫條件下固定時間為8-24小時。一起還要留意防止福爾馬林過度固定構(gòu)成的安排抗原丟掉，有研究發(fā)現(xiàn)新鮮安排經(jīng)過福爾馬林一周固定后安排抗原丟掉嚴(yán)峻，抗原簡直不能被檢查，由于安排固定后會致使蛋白或蛋白分子之間構(gòu)成交聯(lián)，致使抗原位點(diǎn)隱瞞，能夠經(jīng)過抗原批改辦法來批改，若加抗體前不選用抗原批改，則免疫組化染色常不能到達(dá)抱負(fù)成果或不成功。安排同樣不能*放置在70%的乙醇中，酒精固定后的安排形狀不如福爾馬林固定的安排。脫鈣液對抗原損壞較為嚴(yán)峻，因而在安排脫鈣前在福爾馬林液中固定48小時，若安排沒有固定透則酸會損壞抗原，脫鈣液中酸的濃度與脫鈣時間都必須盡量控制在zui低的限度。
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