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行業(yè)產(chǎn)品

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紀(jì)寧(上海)科研試劑經(jīng)銷商


*檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式:李莉查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間:2015-07-30 09:28:54瀏覽次數(shù):305次

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經(jīng)營模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:9975條

所在地區(qū):上海上海市

聯(lián)系人:李莉 (經(jīng)理)

產(chǎn)品簡介

數(shù)據(jù),真實(shí)報(bào)告。*檢測試劑盒全國各地區(qū)一律優(yōu)惠,購買前我司提供電子版說明書,符合實(shí)驗(yàn)要求再購買,ELISA試劑盒我公司為客戶提供售前、售中、售后一條龍服務(wù),敬請放心購買。

詳細(xì)介紹

*檢測試劑盒使用說明書
(酶聯(lián)免疫法)

 1 原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測肌肉組織、牛奶等樣品中的*(Dexamethasone,DEX),試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測時(shí),加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,樣本中的*藥物和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗*藥物抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含*藥物含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中*藥物的殘留量。
*檢測試劑盒2 技術(shù)指標(biāo)
2.1 試劑盒靈敏度:0.1ppb(ng/ml)
2.2 反應(yīng)模式:25℃,30min~30min~15min
2.3 檢測下限:
肌肉組織…………………………………0.2ppb
牛奶………………………………………0.5ppb
飼料………………………………………1ppb
2.4 交叉反應(yīng)率:
*…………………………………*
 2.5 樣本回收率:
組織、牛奶、飼料…………………………80%±15%
3 試劑盒組成
酶標(biāo)板……………………………96孔
標(biāo)準(zhǔn)液:各1ml
0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb
高標(biāo)準(zhǔn)液(紅蓋):100ppb………1ml
酶標(biāo)記物(紅蓋)…………………11ml
抗體工作液(藍(lán)蓋)………………5.5ml
底物液A(白蓋)……………………6ml
底物液B(黑蓋)……………………6ml
終止液(黃蓋)………………………6ml
20X濃縮洗滌液(白蓋)……………40ml
2X復(fù)溶液(黃蓋)…………………50ml
說明書………………………………1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器:酶標(biāo)儀、打印機(jī)、均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:單道20μl-200μl,100μl-1000μl、多道300μl
4.3 試劑:乙酸乙酯、NaOH、正己烷
5 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知:
實(shí)驗(yàn)器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
5.2 配液:
配液1:2M氫氧化鈉溶液
稱40gNaOH加去離子水混勻溶解,定容至500ml。
配液2:0.3M氫氧化鈉溶液
取2M氫氧化鈉溶液75ml,加去離子水定容至500ml。
配液3:復(fù)溶液
    將2×復(fù)溶液用去離子水2倍稀釋,用于樣本的復(fù)溶,復(fù)溶液在4℃環(huán)境可保存一個(gè)月。
5.3 樣本前處理步驟:
5.3.1 肌肉組織樣本處理方法 
1)稱取均質(zhì)后的樣本2±0.05g于50ml離心管中,加入8ml乙酸乙酯,振蕩5分鐘,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘;
2)取上層液體4ml至50ml離心管中,加入4ml 2M 氫氧化鈉溶液,振蕩5min,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘;
3)取2ml上層有機(jī)相至10ml潔凈干燥玻璃試管中,在50-60℃下氮?dú)獯蹈桑?br>4)加入1ml復(fù)溶液溶解干燥的殘?jiān)?,振?min;
5)取100μl進(jìn)行分析。
    樣本稀釋倍數(shù):2    檢測下限:0.2ppb
5.3.2 牛奶樣本處理方法
1)取200ul牛奶樣本,加入0.8ml復(fù)溶液工作液充分混勻;
2)取100μl進(jìn)行分析。
    樣本稀釋倍數(shù):5    檢測下限:0.5ppb
5.3.3 飼料樣本處理方法 
1)稱取碾碎后的飼料樣本1±0.05g于50ml離心管中,加入4ml 0.3M 氫氧化鈉溶液,振蕩混勻,再加入8ml乙酸乙酯,振蕩5分鐘,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘;
2)取1ml上層有機(jī)相至10ml潔凈干燥玻璃試管中,在50-60℃下氮?dú)獯蹈桑?br>3)加入1ml正己烷溶解干燥的殘?jiān)?,再?ml復(fù)溶液,振蕩2min;
4)室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘;
5)去上層,取下層水相100μl進(jìn)行分析。
    樣本稀釋倍數(shù):8    檢測下限:1ppb
6 酶聯(lián)免疫試驗(yàn)步驟
    將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
實(shí)驗(yàn)開始前,用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。
6.1 編    號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
6.2 加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本100μl/孔到各自的微孔中,然后加抗體工作液50μl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光反應(yīng)30分鐘。
6.3 洗    滌:將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250μl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,zui后用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
6.4 加酶反應(yīng):加酶標(biāo)記物100μl/孔,25℃避光反應(yīng)30分鐘。
6.5 洗    滌:同上
6.6 顯    色:加底物液A 50μl/孔,再加底物液B 50μl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘。
6.7 終    止:每孔加入終止液50μl,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。
6.8 測吸光值:用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。
7 結(jié)果分析
7.1 百分吸光率的計(jì)算
    標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以*個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液(0ppb)的吸光度值,再乘以*,即
 百分吸光度值(%)=    A    ×*
    A0    
A—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值
A0—0ppb標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值
7.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算
    以標(biāo)準(zhǔn)液百分吸光率為縱坐標(biāo),對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)液濃度(ppb)的對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)液的半對數(shù)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中待測物的實(shí)際濃度。
    若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算,更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。(索取)
8 注意事項(xiàng)
8.1 室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫(25℃)會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
8.2 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
8.3 混合要均勻,洗板要*,在ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的*性。
8.4 在所有孵育過程中,用蓋板膜封住微孔板,避免光線照射。
8.5 不要使用過了有效期的試劑盒,不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
8.6 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個(gè)單位(A450nm< 0.5 )時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。
8.7 反應(yīng)終止液有腐蝕性,避免接觸皮膚。
9 貯藏及保存期
儲藏條件:試劑盒于2-8℃保存,避免冷凍。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。


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