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所在地區(qū):江蘇鹽城市

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大鼠超氧化物歧化酶(SOD)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

閱讀:153發(fā)布時間:2015-02-25

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    江蘇寶萊生物科技有限公司

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本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍:                                                          48T

2.5 U/mL - 80 U/mL

使用目的:

本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中超氧化物歧化酶(SOD含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠超氧化物歧化酶(SOD)水平。用純化的大鼠超氧化物歧化酶(SOD)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入人超氧化物歧化酶(SOD再與HRP標記的超氧化物歧化酶(SOD抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的超氧化物歧化酶(SOD呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠超氧化物歧化酶(SOD)濃度。

試劑盒組成

1

20倍濃縮洗滌液

20ml×1

7

終止液

3ml×1

2

酶標試劑

3ml×1

8

標準品(160 U/mL

0.5ml×1

3

酶標包被板

12孔×4

9

標準品稀釋液

1.5ml×1

4

樣品稀釋液

3ml×1

10

說明書

1

5

顯色劑A

3ml×1

11

封板膜

2 

6

顯色劑B

3ml×1/

12

密封袋

1

標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

計算

  以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,*使用排槍加樣。

   4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

   5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

   6.底物請避光保存。

   7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

   9.本試劑不同批號組分不得混用。

   10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。


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