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剛開始做血清elisa實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,都會(huì)遇到很多問題,比如標(biāo)本采集后什么時(shí)候開始離心;離心時(shí)要多少轉(zhuǎn);離心幾分鐘才是zui合適的等等?
其實(shí)在做血清elisa實(shí)驗(yàn)時(shí),標(biāo)本離心是越早越好,但大多數(shù)標(biāo)本要在30分鐘后才凝集完,離心的時(shí)間在2個(gè)小時(shí)內(nèi)完成,時(shí)間如果太長(zhǎng)血液中的細(xì)胞成分會(huì)分解血漿中有機(jī)成分,離子也會(huì)發(fā)生轉(zhuǎn)移造成誤差;4度冷藏雖能降低紅細(xì)胞活性但細(xì)胞還會(huì)進(jìn)行緩慢無氧酵解,血糖會(huì)明顯減低,冷藏時(shí)需分離血清儲(chǔ)存;對(duì)于酶免試驗(yàn)影響較小,但時(shí)間太長(zhǎng)也會(huì)引起偏差如蛋白質(zhì)變性,水分蒸發(fā)造成誤差離心速度一般要求1500~3000轉(zhuǎn)之間(25000轉(zhuǎn)),離心速度低會(huì)離心不*,速度過快容易溶血,一般離心5~15分鐘即可(約10分鐘)。
如果是做其他血清elisa實(shí)驗(yàn),遇到與上面類似的問題,都可參照,原理是基本一樣的。
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