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ELISA試劑盒步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間

時(shí)間:2016-11-24閱讀:340
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    操作步驟雖然ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程操作點(diǎn)的許多需要掌握操作步驟。如果稍有不慎,操作不合理的地方,會(huì)造成很多問(wèn)題,ELISA試劑盒影響了檢測(cè)的精度,大大降低了測(cè)試質(zhì)量。如花板,假陽(yáng)性,全彩色,全彩色,顏色空間的低。根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA試劑盒法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA試劑盒法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,

 一、方法學(xué)的影響

ELISA測(cè)定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法,其中競(jìng)爭(zhēng)抑制法因受操作時(shí)差所引起的不平等競(jìng)爭(zhēng)等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制。

二、試劑因素

1.試劑的選擇 :免疫檢測(cè)的原理均基于抗原抗體反應(yīng)。由于該反應(yīng)過(guò)程受多種因素的影響,如普遍存在基質(zhì)效應(yīng)、交叉反應(yīng)等,因而檢測(cè)結(jié)果難以溯源,ELISA試劑盒不同方法、不同試劑之間甚至同一試劑不同批號(hào)間結(jié)果均缺乏可比性。試劑質(zhì)量在很大程度上決定了檢測(cè)的水平,因此在引入新項(xiàng)目之前必須對(duì)試劑進(jìn)行嚴(yán)格的評(píng)估。

2.試劑的準(zhǔn)備 :不同批次的ELISA試劑盒在制作過(guò)程中很難保證質(zhì)量*一致,即使是通過(guò)批批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)結(jié)果也存在差異,因此必須選擇和訂購(gòu)長(zhǎng)批號(hào)的試劑,并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號(hào)改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評(píng)估試劑的復(fù)雜過(guò)程,ELISA試劑盒并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性;對(duì)于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。

 

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