實(shí)體組織分散為單個(gè)細(xì)胞
在實(shí)體組織分散為單個(gè)細(xì)胞的過(guò)程中，解離的方法可能瞬時(shí)地或者持久地影響細(xì)胞的性質(zhì)。細(xì)胞性質(zhì)的變化在形態(tài)上可能是顯而易見(jiàn)的。例如細(xì)胞膜的破損，細(xì)胞表面出現(xiàn)泡狀物等。但有些細(xì)胞性質(zhì)的變化是很難被觀察到的，例如線粒體活性的變化；選擇性表面抗原的丟失；蛋白的丟失等。細(xì)胞被損傷的程度受到實(shí)驗(yàn)條件，例如溫度、pH值、處理時(shí)間等因素的影響。因此，從組織中分散出的單個(gè)細(xì)胞，在某些性質(zhì)上與原來(lái)組織中的細(xì)胞是不同的。所以，對(duì)分散出的單個(gè)細(xì)胞還應(yīng)進(jìn)一步研究，努力改進(jìn)組織分散的方法。在此提出以下幾個(gè)分散原則。
1、分散出的細(xì)胞群體與體內(nèi)原位組織有類似性。例如分化細(xì)胞與未分化細(xì)胞之比；增殖細(xì)胞與靜止細(xì)胞之比；細(xì)胞周期各時(shí)相細(xì)胞之比；帶有某個(gè)特征的細(xì)胞亞群所占的比例等。組織解離過(guò)程中，不應(yīng)造成某種類型細(xì)胞的過(guò)多丟失。
2、分散出的細(xì)胞常用于進(jìn)行DNA的含量分析，因此要求細(xì)胞不要成團(tuán)，碎片很少，DNA分布圖的變異系數(shù)低，以便于準(zhǔn)確地估計(jì)各周期時(shí)相的百分?jǐn)?shù)。
3、為了對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞功能研究，分散出的細(xì)胞群體應(yīng)保持克隆生成能力，并能保持原細(xì)胞的功能。如應(yīng)保持細(xì)胞膜的完整性，細(xì)胞內(nèi)pH值，細(xì)胞膜電位，線粒體的活性等。
目前。檢測(cè)這些細(xì)胞功能的熒光探針和檢測(cè)細(xì)胞結(jié)構(gòu)特征（如細(xì)胞內(nèi)各種大分子物質(zhì)的含量）的熒光探針都在不斷發(fā)展，對(duì)于一個(gè)細(xì)胞用幾種熒光探針標(biāo)記，進(jìn)行多參數(shù)測(cè)量，可以更準(zhǔn)確地識(shí)別和分離細(xì)胞亞群。
4、有些實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)要求分散的細(xì)胞保持體內(nèi)組織的結(jié)構(gòu)和形態(tài)特征。例如對(duì)小腸組織進(jìn)行細(xì)胞動(dòng)力學(xué)分析時(shí)，根據(jù)隱窩細(xì)胞較短，并且處于增殖狀態(tài)，或絨毛細(xì)胞較長(zhǎng)和處于非增殖狀態(tài)，可區(qū)分出兩個(gè)不同的細(xì)胞亞群。因此，分散時(shí)要求保持細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征。如果只是對(duì)腫瘤的細(xì)胞懸液進(jìn)行DNA含量分析，則不需要保持形態(tài)學(xué)特征。實(shí)際利用細(xì)胞核懸液也可以獲得很好的DNA組放圖。
5、為了對(duì)同一細(xì)胞懸液進(jìn)行多次的重復(fù)測(cè)量，希望能獲得較高的細(xì)胞產(chǎn)額。雖然細(xì)胞產(chǎn)額會(huì)受到組織內(nèi)細(xì)胞大小，細(xì)胞間基質(zhì)等因素的影響。一般來(lái)說(shuō)：1克組織含有大約1×109細(xì)胞，少數(shù)的細(xì)胞分散方法，細(xì)胞產(chǎn)額為每克組織多于1×108細(xì)胞，多數(shù)細(xì)胞分散方法細(xì)胞產(chǎn)額為每克組織約1×106—1×107個(gè)細(xì)胞。
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