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酶聯(lián)(上海)生物試劑科技有限公司

豬黃體生成素釋放激素(LHRH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

時間:2015-8-17閱讀:214
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豬黃體生成素釋放激素(LHRH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍:
96T
60 ng/L -1650 ng/L
使用目的:
本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關液體樣本中黃體生成素釋放激素(LHRH)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬黃體生成素釋放激素(LHRH)水平。用純化的
豬黃體生成素釋放激素(LHRH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次
加入黃體生成素釋放激素(LHRH),再與 HRP標記的黃體生成素釋放激素(LHRH)抗體結合,
形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP  酶的催
化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的黃體生成素釋
放激素(LHRH)呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計
算樣品中豬黃體生成素釋放激素(LHRH)濃度。
豬黃體生成素釋放激素(LHRH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書試劑盒組成
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
1.  標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
1600ng/L
800ng/L
400ng/L
200ng/L
100ng/L
5號標準品
4號標準品
3號標準品
2號標準品
1號標準品
150μl的原倍標準品加入  150μl標準品稀釋液
150μl的  5號標準品加入  150μl標準品稀釋液
150μl的  4號標準品加入  150μl標準品稀釋液
150μl的  3號標準品加入  150μl標準品稀釋液
150μl的  2號標準品加入  150μl標準品稀釋液
2.  加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、

 
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,
然后再加待測樣品 10μl(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
配液:將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水  30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30秒后棄去,如此
重復 5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
溫育:操作同 3。
洗滌:操作同 5
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),

即為樣品的實際濃度。
豬黃體生成素釋放激素(LHRH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在 5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本  OD值
大于標準品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
豬黃體生成素釋放激素(LHRH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月

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