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上海酶聯(lián)生物研究所

酶聯(lián)生物:試驗(yàn)時(shí)怎么挑選到適合試驗(yàn)的抗體呢?

時(shí)間:2020-3-12閱讀:206
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一、關(guān)于特異性的挑選:特異性的挑選首要需求考慮四個(gè)方面:蛋白特異性、種屬特異性、試驗(yàn)辦法特異性、符號(hào)物的特異性。

1、抗體蛋白特異性:針對(duì)需求檢測(cè)的蛋白查找抗體,幾個(gè)細(xì)節(jié)要差異,重組表達(dá)的蛋白和內(nèi)源性蛋白的檢測(cè),對(duì)抗體的要求是不相同的,留心檢查抗體說(shuō)明書的檢測(cè)說(shuō)明。假定重組蛋白不是全長(zhǎng)表達(dá),則需求留心抗體的免疫原區(qū)域是否在重組蛋白區(qū)域內(nèi)。

2、種屬特異性:同種蛋白不同物種,有著或大或小的差異。現(xiàn)在大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規(guī)劃多肽抗原的,依據(jù)蛋白的同源性的狀況與其他種屬發(fā)作交叉反響。需求參照說(shuō)明書注明的可反響種屬信息。一些稀有種屬很難找到抗體,可以通過(guò)蛋白的序列比對(duì),挑選同源序列免疫的抗體。

3、試驗(yàn)辦法特異性:現(xiàn)在運(yùn)用抗體的試驗(yàn)辦法有許多,不同的運(yùn)用辦法過(guò)程中,因?yàn)閷?duì)蛋白樣品的處理辦法不相同,蛋白的含量有差異,對(duì)抗體的辨認(rèn)表位和效價(jià)要求都是不相同的。具體的依據(jù)說(shuō)明書注明的產(chǎn)品應(yīng)用辦法進(jìn)行挑選。

4、抗體符號(hào)物的特異性一般依據(jù)試驗(yàn)操作的試驗(yàn)辦法不會(huì)運(yùn)用帶有符號(hào)的一抗,比如WB、IHC等,都是通過(guò)二抗類的試劑符號(hào)抵達(dá)效果出現(xiàn)的意圖??墒且罁?jù)儀器剖析的一些試驗(yàn),或許就會(huì)運(yùn)用到直接符號(hào)的一抗,比如流式試驗(yàn)。

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