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上海酶聯(lián)生物研究所

體外誘導大鼠成肌細胞轉(zhuǎn)化為成骨前體細胞的實驗研究

時間:2015-6-23閱讀:125
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   探討大鼠成肌細胞體外能否轉(zhuǎn)化為成骨前體細胞.
   方法:從新生大鼠骨骼肌分離單細胞,體外培養(yǎng),運用差速貼壁法和(或)酶消化法純化細胞,培養(yǎng)至第3代時,加入含重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(rhBMP-2)的培養(yǎng)液進行誘導,3周后對誘導細胞進行鑒定,其指標包括:細胞形態(tài)、堿性磷酸酶染色及其活性、Ⅰ型膠原免疫組化染色和鈣結(jié)節(jié)染色,實驗數(shù)據(jù)采用SAS 9.1.3軟件包進行統(tǒng)計學分析.
   結(jié)果:成肌細胞誘導后,細胞增殖減緩,相鄰細胞聚集呈層狀排列,誘導7 d可見胞漿有少量不透光結(jié)節(jié),誘導2周結(jié)節(jié)增多,3周時胞漿內(nèi)可見大量不透光結(jié)節(jié),對照組成肌細胞融合成有收縮性的肌管.誘導后的成肌細胞堿性磷酸酶活性隨時間延長而增強,誘導3周時堿性磷酸酶染色、Ⅰ型膠原和鈣結(jié)節(jié)染色均呈陽性表達.
   結(jié)論:大鼠成肌細胞在體外一定條件下誘導后能夠轉(zhuǎn)化為成骨前體細胞.

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