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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>公司動態(tài)>>與您細(xì)談ELISA試劑盒抽吸的操作技巧方法
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在ELISA試劑盒實驗中,洗刷是關(guān)鍵過程之一。而有一些參數(shù)會影響洗刷過程的作用,這些參數(shù)包括吸液高度和吸入方位,這兩者都能調(diào)整,以下降布景(殘留量)和差異。今日試劑盒與您細(xì)談ELISA抽吸的操作竅門 :
殘留液體中包括未的抗原或抗體,它們會添加布景信號。殘留量越小,殘留液體越少,轉(zhuǎn)移到下一步的干擾液體也就越少。吸液高度會顯著影響殘留量;假如洗刷吸頭與反響孔底部的距離稍大,那就會讓殘留量急劇添加。反之,假如洗刷吸頭壓著反響孔底部,那么也會使吸液效率下降,殘留量添加。
目前的洗板機(jī)通常運(yùn)用兩種類型的洗頭:剛性和起浮的。起浮洗頭中的吸頭可在洗刷過程中自在上下移動,而剛性洗頭則固定在恰當(dāng)?shù)姆轿弧_\(yùn)用剛性洗頭的洗刷操作在優(yōu)化起來更為雜亂,由于你需求十分細(xì)心地調(diào)整吸液高度。假如你們試驗室運(yùn)用幾種不一樣的板,那可能會很耗時。在運(yùn)用起浮洗頭時,吸頭會降到反響孔的底部。調(diào)整高度就不是很主要,因而洗頭會下降到底部。
抽吸的方位也對殘留量有著主要影響;假如每個孔只運(yùn)用一個抽吸點(diǎn)(這很多見,由于更快),那么抽吸的方位需求優(yōu)化。的方位取決于洗頭的性狀,但它幾乎不在反響孔的中心,即使這是一切洗頭zui多見的默許方位。通常來說,方位在孔中心與孔壁之間的某處。
操作方法總結(jié):
各種類型ELISA測定時一般需經(jīng)過這些步驟:固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。
A、重復(fù)某一樣品時,加樣時間盡可能與*次接近。
B、加樣后在混勻器上充分混勻。
ELISA結(jié)果表示:
1、定性測定。
2、半定量測定,結(jié)果一般以滴度表示。
3、定量測定,即用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果以量或單位表示,在ELISA定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
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