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上海酶聯(lián)生物研究所

ELISA各環(huán)節(jié)中常見問題及解決方法

時間:2017-5-11閱讀:220
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首要從事小鼠ELISA試劑盒,放免法試劑盒,動物血清,培養(yǎng)基報價,植物elisa試劑盒 細菌培養(yǎng)基 金標試劑盒 抗生素標準品,首要商品有:ELISA試劑盒、PCR試劑盒、金標試劑盒、細胞、血清、抗體、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、對照品、標準品等。
ELISA試劑盒實驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的運用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的查看效果影響較大,如不注意,有或許致使顯色不全、花板等效果。
上海酶聯(lián)生物將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的要素及解決辦法總結(jié)于下,以期給同行帶來一些啟示,前進試驗質(zhì)量。
下面分析Elisa試驗操作中或許影響效果的要素,并給出相應(yīng)的解決辦法
選擇試劑

選擇質(zhì)量優(yōu)異的查看試劑,嚴峻按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
一、加樣
或許要素:
1)血清或血漿標本別離欠好即進行加樣; 2)手工操作中,加樣板過多構(gòu)成加樣后放入孵箱前等候時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺起孔外。
解決辦法:
標本為血清:將血液先天然寄存1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:有必要運用含抗凝劑的血液標本搜集管,采血后有必要當(dāng)即倒置*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)查看,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 ELISA試劑盒加樣后及時放入孵箱。加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。  假如選用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 標本較多時,請分批操作。
二、 孵育
或許要素:
孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清潔*; 孵育時間人為延伸,致使非特異性緊附于反響孔周圍,難以清潔*。
解決辦法:
 貼封片或加蓋;  按說明進程嚴峻操控操作時間。
三、洗板
或許要素:
選用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。選用半自動洗板機洗板時,洗液量缺少,致使洗板不*;洗板針阻塞,抽吸不*;洗板不暢,致使洗板效果差。  反響板過多構(gòu)成洗板等候時間長。
解決辦法:
保證洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(選擇潔凈、無或少塵的吸水資料)上輕輕拍干; 2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
四、顯色
或許要素:
顯色劑制作后放置時間過長或運用過期顯色劑; 加顯色劑時濺起孔外構(gòu)成液體回流。 顯色劑盡量在臨用前制作,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 加樣時堅持顯色劑不外流; A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)異試劑外,ELISA試劑盒有必要嚴峻按照操作進程進行操作,一起作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以慎重的工作作風(fēng)查看每一份標本,才華保證查看質(zhì)量。如今國內(nèi)已有恰當(dāng)數(shù)量的單位具有全自動酶標儀,這對于完結(jié)ELISA標準化查看、前進查看質(zhì)量起到了重要效果。

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