ELISA試劑盒作為一種固相免疫測(cè)定，抗原抗體的結(jié)合反響在固相上進(jìn)行，要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合，必須在必定的溫度條件下反響一定的時(shí)刻。溫育所需時(shí)刻與溫度成反比，即溫度越高，則所需時(shí)刻相對(duì)較短。zui為常用的溫育溫度有37℃和室溫，其次是43℃和2～8℃。一些操作者，擅自改變說明書操作，ELISA試劑盒檢測(cè)成果牢靠的必要條件。ELISA試劑盒的操作因固相載體的構(gòu)成不同而有所差異，國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)查驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。

ELISA試劑盒需要將微孔板中培育的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化，然后再用抗體原位檢測(cè)。ELISA試劑盒POT有點(diǎn)像蛋白印跡Western blot，先在帶膜的微孔板中培育細(xì)胞，然后在膜上檢測(cè)細(xì)胞排泄的抗原構(gòu)成斑駁。此外，我們還需要根據(jù)本身需要挑選96孔板或是384孔板進(jìn)行ELISA試劑盒試驗(yàn)。

ELISA試劑盒試驗(yàn)，雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測(cè)抗體之間，這種辦法既活絡(luò)又有用，受到了許多研究者的喜愛。不過有時(shí)分雙抗夾心法并不是挑選，例如有時(shí)分抗原特別小讓兩個(gè)大抗體難以附著，又或者抗體只要一個(gè)抗體結(jié)合位點(diǎn)。
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國(guó)外試劑均與特別儀器合作應(yīng)用，兩者均有具體的運(yùn)用說明，嚴(yán)厲遵循規(guī)則操作，必能得出的成果。ELISA試劑盒產(chǎn)品必定有運(yùn)用微量加樣器加入樣本的過程。留意的要害點(diǎn)是：加樣不行太快，要防止加在孔壁上部，不行濺起和發(fā)生氣泡。加樣太快，無法確保微量加樣的性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導(dǎo)致非特異吸附。濺起會(huì)對(duì)附近孔發(fā)生污染。因而一般用于檢測(cè)較強(qiáng)的光，如熒光檢測(cè)。而白色的酶標(biāo)板就用于較弱的光檢測(cè)，常用于一般的化學(xué)發(fā)光。別的黑色的酶標(biāo)板還可以消弱非特異反響帶來的問題。有些客戶會(huì)問，ELISA試劑盒用一般的酶標(biāo)板可不行以進(jìn)行發(fā)光檢測(cè)，回答是不行以的，由于一般從化學(xué)發(fā)光反響中發(fā)射出的光是各向同性的，也就是說各個(gè)方向上平等發(fā)射出來的。假如用通明的板子，光不只會(huì)從筆直方向發(fā)散，還從水平方向發(fā)散出來。