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上海酶聯(lián)生物研究所

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人胚肺細胞 (WI-38)

參  考  價:面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品牌

廠商性質生產(chǎn)商

所在地上海市

更新時間:2017-07-27 12:30:33瀏覽次數(shù):628次

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本司*供應細胞、ELISA試劑盒、生物試劑、血清、抗體、培養(yǎng)基、標準品等多種科研試劑產(chǎn)品,產(chǎn)品優(yōu)質耐用,性價比好,值得信賴,需要“人胚肺細胞 (WI-38)"歡迎您。

人胚肺細胞 (WI-38)細胞介紹:
WI-38*系來自3個月的正常胚胎肺組織。該細胞系是首株用于人類疫苗制備的*系。培養(yǎng)液中添加TNFalpha可以促進細胞生長。
細胞特性:
1)來源:正常肺
2)形態(tài):成纖維細胞
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
運輸和保存:使用含有優(yōu)質胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞。收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入*使用的培養(yǎng)基后轉移至l〇cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。


人胚肺細胞 (WI-38)細胞培養(yǎng)步驟:
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1.準備 MEM 培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號 11095-080);北美胎牛血清(United States, GIBCO,貨號 16000-044),10%; PS 1%。
2.培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3.凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細胞處理:
1.復蘇細胞:將含有l(wèi)mL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入l〇cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2.細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。


人胚肺細胞 (WI-38)對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。力口2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2ml*培養(yǎng)基 終止消化。按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3.細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。
下面T25瓶為例;
細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入lml*,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每lml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


注意事項:
收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
人胚肺細胞 (WI-38)細胞用途:僅供科研使用。

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