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上海酶聯(lián)生物研究所

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人靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HUV-EC)

參  考  價:面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號

品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所在地上海市

更新時間:2017-07-26 21:56:21瀏覽次數(shù):192次

聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線
本司*供應(yīng)細(xì)胞、ELISA試劑盒、生物試劑、血清、抗體、培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)品等多種科研試劑產(chǎn)品,產(chǎn)品優(yōu)質(zhì)耐用,性價比好,值得信賴,需要“人靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HUV-EC)"歡迎您。

人靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HUV-EC)細(xì)胞介紹:
該細(xì)胞來源于人靜脈內(nèi)皮,可在半固體培養(yǎng)基中形成克隆,在免疫抑制小鼠中不能形成腫瘤。
細(xì)胞特性:
1)來源:人靜脈內(nèi)皮
2)形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存:可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:(1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。收到細(xì)胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們。


人靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HUV-EC)細(xì)胞接收后的處理:
1.收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2.請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37°C培養(yǎng)約 2-3h。
3.棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4.如果細(xì)胞長滿80%-90%請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用本公司附帶的*
培養(yǎng)基。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1.準(zhǔn)備 F-12K 培養(yǎng)基(F-12K:SIGMA,貨號 N3520,添加 0.1 mg/ml 肝素;0.03-0.05 mg/ml內(nèi)皮細(xì)胞生長因子),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2.培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3.凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細(xì)胞處理:
復(fù)蘇細(xì)胞:將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。


人靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HUV-EC)對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。力口2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。
下面T25瓶為例;
細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入lml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。lOOOrpm離心分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每lml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


注意事項(xiàng):
收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
人靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HUV-EC)細(xì)胞用途:僅供科研使用。

人胚腎細(xì)胞(293FT)

本司*供應(yīng)細(xì)胞、ELISA試劑盒、生物試劑、血清、抗體、培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)品

人胚腎細(xì)胞(293T)

本司*供應(yīng)細(xì)胞、ELISA試劑盒、生物試劑、血清、抗體、培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)品

人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞(769-P)

本司*供應(yīng)細(xì)胞、ELISA試劑盒、生物試劑、血清、抗體、培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)品

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