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上海酶聯(lián)生物研究所

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人臍靜脈融合細(xì)胞(EA.hy926)

參  考  價:面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號

品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所在地上海市

更新時間:2017-07-26 17:00:53瀏覽次數(shù):145次

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本司*供應(yīng)細(xì)胞、ELISA試劑盒、生物試劑、血清、抗體、培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)品等多種科研試劑產(chǎn)品,產(chǎn)品優(yōu)質(zhì)耐用,性價比好,值得信賴,需要“人臍靜脈融合細(xì)胞(EA.hy926)"歡迎您。

人臍靜脈融合細(xì)胞(EA.hy926)細(xì)胞特性:
1)來源:靜脈內(nèi)皮細(xì)胞與A549細(xì)胞株融合
2)形態(tài):梭形,貼壁生長
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存:使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入*使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至l〇cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
細(xì)胞介紹:
在PEG脅迫下,將原代培養(yǎng)的人臍靜脈細(xì)胞與抗硫*的A549克隆株融合, 構(gòu)建了人臍靜脈細(xì)胞株,EA.hy926。融合子在HAT培養(yǎng)基上生長并以八因子相關(guān)抗原篩選。EA.hy926己經(jīng)過100次以上的群體倍增(PDLs)。電鏡照片顯示 Weibel-Palade小體的細(xì)胞質(zhì)分布以及組織特異性的細(xì)胞器,分化的內(nèi)皮細(xì)胞特性 如血管生成,體內(nèi)平衡/血栓形成,血壓及炎癥反應(yīng)。


人臍靜脈融合細(xì)胞(EA.hy926)細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1.準(zhǔn)備 DMEM-H 培養(yǎng)基(DMEM-H,GIBCO,貨號 12800017,添加 NaHC031.5g/L), 90%;胎牛血清,10%。(DMEM 液體培養(yǎng)基:GIBCO,11995-065)。
2. 培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱 濕度為70%-80%。
3.凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細(xì)胞處理:
復(fù)蘇細(xì)胞:將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入l〇cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。


人臍靜脈融合細(xì)胞(EA.hy926)對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。力口2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約lml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加1〇%DMSO后進(jìn)行凍存。


注意事項(xiàng):
收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
人臍靜脈融合細(xì)胞(EA.hy926)細(xì)胞用途:僅供科研使用。
 

人胚腎細(xì)胞(293FT)

本司*供應(yīng)細(xì)胞、ELISA試劑盒、生物試劑、血清、抗體、培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)品

人胚腎細(xì)胞(293T)

本司*供應(yīng)細(xì)胞、ELISA試劑盒、生物試劑、血清、抗體、培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)品

人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞(769-P)

本司*供應(yīng)細(xì)胞、ELISA試劑盒、生物試劑、血清、抗體、培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)品

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