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上海酶聯(lián)生物研究所

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人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞(CCRF-CEM)

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所在地上海市

更新時(shí)間:2017-07-26 16:49:23瀏覽次數(shù):236次

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本司*供應(yīng)細(xì)胞、ELISA試劑盒、生物試劑、血清、抗體、培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)品等多種科研試劑產(chǎn)品,產(chǎn)品優(yōu)質(zhì)耐用,性價(jià)比好,值得信賴,需要“人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞(CCRF-CEM)"歡迎您。

人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞(CCRF-CEM)細(xì)胞介紹:
G.E. Foley等人建立了類淋巴母細(xì)胞細(xì)胞株CCRF-CEM。細(xì)胞是1964年11月從一位四歲白人女性急性淋巴細(xì)胞白血病患者的外周血白血球衣中得到。
細(xì)胞特性:
1)來源:白血病,急性淋巴細(xì)胞白血病,外周血,T淋巴母細(xì)胞
2)形態(tài):淋巴母細(xì)胞
3)含量:>lxl06 個(gè)/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存:可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:(1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇;(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。


人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞(CCRF-CEM)細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1.準(zhǔn)備 RPIVM-1640 培養(yǎng)基(RPIVM-1640:GIBCO,貨號 31800022,添加 NaHC03 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g八,丙酮酸鈉O.llg八),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2.培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱 濕度為70%-80%。
3.凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
2)細(xì)胞處理:
復(fù)蘇細(xì)胞:將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入l〇cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢 查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。


人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞(CCRF-CEM)對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。力口2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部 分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加l-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的 新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì) 胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄 去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約lml含血清的培養(yǎng)基后 加入凍存管中,再添加1〇%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加 入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入1〇%DMSO后進(jìn)行凍 存。


注意事項(xiàng):
收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞(CCRF-CEM)細(xì)胞用途:僅供科研使用。

人胚腎細(xì)胞(293FT)

本司*供應(yīng)細(xì)胞、ELISA試劑盒、生物試劑、血清、抗體、培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)品

人胚腎細(xì)胞(293T)

本司*供應(yīng)細(xì)胞、ELISA試劑盒、生物試劑、血清、抗體、培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)品

人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞(769-P)

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