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271次白介素12(IL-12)ELISA試劑盒一些參數(shù)會(huì)影響洗滌步驟的效果。*個(gè)主要的參數(shù)是洗滌量,自動(dòng)洗板機(jī)會(huì)分配洗滌液。如果您之前遭遇過高背景,那么不要猶豫,將洗滌量調(diào)為高,是比包被體積更高。上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)員特別說明道,太少的洗滌液會(huì)讓一部分分析表面洗滌不到,從而明顯增加背景。所有反應(yīng)孔的洗滌量必須相同。ELISA板的制造商通常會(huì)在試劑盒的使用手冊中列出包被量。行業(yè)中通常使用的包被量是200μl。如果您的試劑盒也是這樣,那么制造商可能會(huì)建議使用300μl洗滌液進(jìn)行洗滌,以便清潔整個(gè)反應(yīng)孔的壁。一般來說,洗滌量越高,則孵育步驟殘留的抗體或抗原量就越少。
1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2. 白介素12(IL-12)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
5. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
6. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
10.按照ELISA試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
11.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
12.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
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