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上海通蔚生物科技有限公司

解析大鼠Elisa試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理

時(shí)間:2015-9-1閱讀:670
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   大鼠Elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
   大鼠Elisa試劑盒的樣品類型/SampleType:血清、血漿等其它指標(biāo)樣品;
血漿:抗凝劑推薦使用EDTA,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè)。避免使用溶血,高血脂標(biāo)本。
   大鼠Elisa試劑盒其它生物標(biāo)本:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè)標(biāo)本應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。標(biāo)本收集后若不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次使用量分裝,凍存于-20℃/-80℃電冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融,6個(gè)月內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),4℃保存的應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。如果樣本中檢測(cè)物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù))。
血清:全血標(biāo)本于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。
大鼠Elisa試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理:
    用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗L-Selectin/CD62L抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、*化的抗L-Selectin/CD62L抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的L-Selectin/CD62L呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。

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