實驗材料 原位雜交玻片
試劑、試劑盒 吉姆薩染色液磷酸鈉緩沖液乙醇二甲苯
儀器、耗材 染色盤培養(yǎng)箱濾紙
實驗步驟
1. 將顯影的玻片置于玻片架上，浸入盛有水的染色盤中。
（1）1個盤：pH6.8 10 mmol/l 磷酸鈉緩沖液，所配的25倍稀釋的吉姆薩染液。
（2）3個盤：水。
（3）脫水系列溶液：
①3個盤：分別盛50%、70%和95%乙醇。
②2個盤：盛有100%乙醇。
③3個盤：盛有二甲苯。
3. 在25倍稀釋的吉姆薩染液中染玻片20 s（依染色時間決定染色的強弱），將玻片在水中浸泡3次，每次2 min。
4. 連續(xù)用乙醇脫水系列溶液處理，每盤中浸泡2 min，將玻片移至二甲苯盤中，毎次浸泡2 min，共3次。
5. 在通風櫥中，按如下操作壓片固定：用一平頭鑷（拿在左手），從二甲苯中取出一塊玻片，夾住磨面端置水平。加4滴Permount 的于另一端（切片所處位置），左手拿一干凈的蓋玻片，很緩慢地放在載玻片上（在加壓片固定介質(zhì)和蓋玻片前，勿使玻片變干，因微小氣泡會造成人為假象）。
6. 用3MM 濾紙，沿蓋玻片邊緣，小心吸去多余固片介質(zhì)/二甲苯，并擦拭載玻片背面（勿擦拭蓋玻片）。
7. 將玻片平放于一硬紙盒盤上，置42℃溫孵箱2天使之凝固。
8. 以剃須刀片小心刮去載玻片背面殘留膠乳，染料及固片介質(zhì)。用鏡頭紙或普通棉紙擦去塵埃。放入玻片盒，必要時，載玻片上再注明標簽。
9. 顯微鏡觀察玻片，觀察時可依信號強弱，調(diào)節(jié)光亮。
收起
注意事項
1. 勿將玻片直立存放于玻片中，因此時固片介質(zhì)尚未凝結。
