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上海彩佑實(shí)業(yè)有限公司
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閱讀:393發(fā)布時(shí)間:2015-8-7
實(shí)驗(yàn)方法原理 在生活細(xì)胞內(nèi),原生質(zhì)的活躍運(yùn)動(dòng)現(xiàn)象統(tǒng)稱為原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)。原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)是生活細(xì)胞的重要標(biāo)志之一。原生質(zhì)可以在細(xì)胞內(nèi)流動(dòng),也可以通過(guò)胞間連絲穿流于細(xì)胞與組織之間,有時(shí)并非全部原生質(zhì)都參與運(yùn)動(dòng)而于局部細(xì)胞質(zhì),往往原生質(zhì)表面的透明層(Hyaloplasm)處于靜止?fàn)顟B(tài)。
原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)在所有生活細(xì)胞中均可見(jiàn),但往往在某些特定材料中表現(xiàn)得特別明顯。有時(shí)由于在制片時(shí)對(duì)材料的機(jī)械損傷,也會(huì)引起原生質(zhì)發(fā)生強(qiáng)烈的運(yùn)動(dòng)。
原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)是生活體消耗能量而做功的生理過(guò)程,它與植物體內(nèi)的物質(zhì)運(yùn)輸及分配以及多種酶促反應(yīng)密切。原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)有各種形式,一般將原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)歸為兩類,凡并非因外界環(huán)境的改變而引起的原生質(zhì)運(yùn)動(dòng),稱為自發(fā)性的原生質(zhì)運(yùn)動(dòng);由于某種外界原因而引起的原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)稱為誘發(fā)性的原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)。
本實(shí)驗(yàn)使用光學(xué)顯微鏡觀察幾種植物細(xì)胞原生質(zhì)的運(yùn)動(dòng)現(xiàn)象;測(cè)定原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)的速度及觀察呼吸抑制劑2,4-二硝基酚(DNP)對(duì)原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)的影響。
實(shí)驗(yàn)步驟
材料和設(shè)備
黑藻、輪藻、小麥幼苗(種子萌發(fā)2-3天根長(zhǎng)1-2 cm )、紫鴨趾草(正在開(kāi)花的)、洋蔥鱗莖(未萌發(fā)的紫皮鱗莖)、南瓜葉片表皮毛或莖部表皮毛、粘菌的原生質(zhì)團(tuán)、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、解剖針、鑷子、剪刀、紗布、擦鏡紙、目鏡測(cè)微尺、臺(tái)尺、秒表、濾紙。
5×10-4 M 的2,4-二硝基*溶液
實(shí)驗(yàn)步驟
1.觀察幾種植物細(xì)胞的原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)現(xiàn)象。
(1)黑藻葉片的觀察:用鑷子取下黑藻幼嫩葉片放于載玻片上,滴加清水并蓋上蓋玻片,在顯微鏡下觀察,尋找沿葉片中脈的部分,細(xì)胞中葉綠體隨原生質(zhì)沿胞壁移動(dòng)(若室溫低于20℃或陰天看不見(jiàn)原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)現(xiàn)象時(shí),可用強(qiáng)光照射15-20 分鐘后再觀察)。注意整個(gè)葉片中哪些部分原生質(zhì)流動(dòng)得zui快,相鄰兩細(xì)胞中流動(dòng)方向有何不同。
(2)輪藻節(jié)間細(xì)胞的觀察,取一株粘藻(含有兩個(gè)以上的節(jié))節(jié)間,用水洗凈后置于載玻片上,加蓋玻片于顯微鏡下觀察,由于輪藻節(jié)間外面常有沉積物附著不易看清,因此可先在低倍物鏡下移動(dòng)載玻片,找到合適的部分后再換高倍物鏡觀察,細(xì)胞中排列整齊的葉綠體并不移動(dòng),而原生質(zhì)透明部分夾帶著大小顆粒一起流動(dòng),小心地調(diào)動(dòng)細(xì)螺旋仔細(xì)觀察。
(3)小麥根毛的觀察:將小麥根剪下放在載玻片上,加蓋玻片在低倍鏡下找到根尖以上的根毛區(qū),然后在高倍鏡下進(jìn)行鏡檢,可以看到透明原生質(zhì)夾帶一些顆粒沿根毛細(xì)胞壁流動(dòng),注意根毛和基部原生質(zhì)流動(dòng)方向的變化。
(4)紫鴨跖草雄蕊毛的觀察:將正在開(kāi)放或即將要開(kāi)的紫鴨跖草的花剝開(kāi),用鑷子取下幾根雄蕊毛,在顯微鏡下觀察,可見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)的原生質(zhì)以不固定的方向流動(dòng)。
(5)洋蔥鱗莖內(nèi)表皮的觀察:用鑷子撕取洋蔥鱗莖內(nèi)表皮,在顯微鏡下觀察,可看到細(xì)胞中原生質(zhì)的運(yùn)動(dòng)。
(6)輕輕取下南瓜葉片表皮或莖部表皮,置于載玻片上,滴上清水后蓋上蓋玻片,于鏡下進(jìn)行鏡檢,可見(jiàn)原生質(zhì)絲縱橫交錯(cuò)地包在表面,原生質(zhì)的運(yùn)動(dòng)可以其中小顆粒的位移作為指標(biāo)。仔細(xì)觀察原生質(zhì)的運(yùn)動(dòng)方向及其通過(guò)胞間連絲穿流于細(xì)胞的情況。
(7)觀察萌發(fā)的花粉管,可見(jiàn)原生質(zhì)在花粉管中的環(huán)流現(xiàn)象。
2.測(cè)定原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)的速度
可以原生質(zhì)中某些顆粒的移動(dòng)速度作指標(biāo)來(lái)測(cè)定原生質(zhì)的運(yùn)動(dòng)速度。但原生質(zhì)顆粒大小不一,它的移動(dòng)速度亦異,因此應(yīng)盡量選用較小的顆粒,進(jìn)行多次測(cè)定,求出平均值。
先將目鏡測(cè)微尺裝入目鏡,將臺(tái)尺(一小格相當(dāng)于0.1 mm即10 μm)置于載物臺(tái)上,求出目鏡測(cè)微尺每格相當(dāng)于多少毫米(或微米),移去臺(tái)尺。將植物材料放在顯微鏡下用同一物鏡觀察。轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡,使其中的測(cè)微尺與原生質(zhì)的流動(dòng)方向平行,用秒表求出每走若干格(視植物材料而定)所需的時(shí)間,測(cè)10-20次求出平均值。
3.呼吸抑制劑DNP(2,4─二硝基酚)對(duì)原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)的影響
原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)需要消耗能量,這要靠呼吸作用來(lái)提供。DNP能抑制呼吸過(guò)程中磷酸化過(guò)程,因而也就抑制了原生質(zhì)運(yùn)動(dòng)。
反復(fù)將5×10-4 M的DNP滴加在載玻片的一端,在另一端用濾紙片吸引,10-20 分鐘后,可見(jiàn)原生質(zhì)流動(dòng)減緩甚至停止。
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