硫酸葡聚糖（仿肝素）親和填料的特點(diǎn)和技術(shù)指標(biāo)

產(chǎn)品介紹

NuPerley DexS-HbP 和 NuPerley DexS-VirS 是將硫酸葡聚糖（Dextran Sulfate）鍵合在新一代高剛性瓊脂糖微球 NuPerley 上形成的一種親和層析分離介質(zhì)。硫酸葡聚糖又稱右旋糖酐硫酸酯，是天然多糖右旋糖酐的合成衍生物，具有與肝素類似的的生物活性，

是一種非動物源的仿肝素配基，填料產(chǎn)品被稱為仿肝素親和填料。NuPerley DexS-HbP 的含硫量相對低（40~80 μmol/mL），可用于蛋白的親和分離、純化，例如血漿蛋白。同時，硫酸酯是一種優(yōu)良的耐鹽型陽離子交換配基，NuPerley DexSHbP 也可作為陽離子交換填料，對溶菌酶的結(jié)合量大于 60 mg/mL，且在 50~150 mM NaCl鹽濃度下仍結(jié)合良好。NuPerley DexS-VirS 的含硫量相對高（70~130 μmol/mL），主要用于病毒和病毒樣顆粒（VLP）的捕獲與純化。

使用方法參考

 色譜柱裝填

以下闡述與層析系統(tǒng)連接時，填料的色譜柱裝填方法。

（1）所有需要用到的材料的溫度要與色譜操作的溫度一樣，液體最好做脫氣處理。裝柱液一般為純水，也可含 10~100 mM NaCl。

（2）填料用量計算：通過沉降定量填料體積，需要的沉降填料體積=柱體積×壓縮比（也稱壓縮因子）。沉降體積是指填料在 20%乙醇保存液中自然沉降完全讀取的穩(wěn)定體積。NuPerley DexS-HbP 和 NuPerley DexS-VirS 的壓縮比為~1.10。為使達(dá)到裝柱比，

可通過柱頭下壓的方法，也可以通過高流速壓柱。

（3）填料清洗：將填料懸液充分搖勻后量取相應(yīng)體積，抽濾除去液體，并用約 3 倍填料體積的純化水洗滌，重復(fù) 3 次，以除去保存液。

（4）裝柱填料懸液準(zhǔn)備：將填料轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)娜萜髦校尤脒m量的裝柱液，制成50~75 v%的裝柱填料懸液，使用前攪勻。

（5）裝填前準(zhǔn)備：在清洗干凈的層析柱下端加入裝柱液，以除去下墊片及層析柱下端的空氣，在柱內(nèi)保留少量的純水，擰緊下堵頭，調(diào)整柱子使其垂直于地面。

（6）裝填：將攪勻后的填料懸液一次性緩慢倒入層析柱內(nèi)（必要時使用裝柱器），為避免引入氣泡，應(yīng)使之沿層析柱內(nèi)壁自然流下。將所有填料加入后，用裝柱液將裝柱器加滿，擰緊裝柱器上蓋，將柱子與層析系統(tǒng)連接。

（7）壓柱：使柱內(nèi)填料自然沉降（或 50~150 cm/h 的低流速下沉降），待填料沉降完全后（填料與液體的界面清晰），去除裝柱器，裝上上柱頭，并將柱頭下降至界面處；通過高流速（推薦流速見下表，注意柱壓不超過 0.3 MPa），繼續(xù)壓柱至界面清晰穩(wěn)定，

標(biāo)記界面穩(wěn)定時的柱高。停泵，打開柱頭上的閥門/堵頭，關(guān)閉柱底的閥門/堵頭，下壓柱頭至標(biāo)記位置下方與壓縮比對應(yīng)的位置，旋緊柱頭，裝柱完成。裝柱完成后，需用高流速平衡柱內(nèi)的填料。