羅丹明123的使用！

羅丹明123 (Rhodamine 123、羅丹明123, Rh 123)是一種可以通過細(xì)胞膜的選擇性染色活細(xì)胞線粒體的熒光染料，呈黃綠色熒光，多用于檢測(cè)線粒體膜電位，也常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)。它可以快速通過細(xì)胞膜，僅需幾分鐘就可以被具有活性的線粒體所俘獲，并且對(duì)細(xì)胞沒有任何毒性。Rhodamine 123還用于對(duì)許多種細(xì)胞進(jìn)行染色，包括植物細(xì)胞和細(xì)菌，由于細(xì)胞內(nèi)ATP的量與Rh123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性，因此Rh123也被用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的ATP。

溶解性：

溶于乙醇，參考濃度1mg/ml。

溶液的配制

用DMSO溶解，終濃度為1-5 mM。溶液分裝，避光保存于-20 oC。

羅丹明123使用方法

1. 用載玻片準(zhǔn)備細(xì)胞。細(xì)胞數(shù)目應(yīng)為 5×104～5×105個(gè)/mL。

2. 孵育該載玻片，用 PBS或Hank’s 液洗滌細(xì)胞。

3. 用培養(yǎng)基稀釋 Rh123母液以制備 1～20µM Rh123緩沖液。具體工作濃度取決于細(xì)胞類型和細(xì)胞濃度。

4. 將 Rh123緩沖液加入載玻片并在37℃下孵育 30 分鐘至 1 小時(shí)。

5. 去除 Rh123 緩沖液并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞（洗滌細(xì)胞后為了固定，加入 10%福爾馬林緩沖液并孵育 15～20 分鐘，接著用 PBS洗滌）。

6. 用帶有熒光素濾光片的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。