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軍團菌乳膠凝集試劑盒

　　一、用途

　　軍團菌乳膠凝集檢測試劑用于快速確證鑒定從選擇性平板上分離出的可疑嗜肺軍團菌和常規(guī)分離的軍團菌。試劑盒適用于檢測由疑似嗜肺軍團菌引起的肺炎病人的樣品或環(huán)境樣品。試劑盒可分別檢測嗜肺軍團菌血清1群和2-15群和常規(guī)分離的軍團菌。(根據微生物檢測手冊提及嗜肺軍團菌血清16群，血清16群與血清6型交叉反應，因此理論上2-15群乳膠試劑也與血清16群凝集)。該試劑盒僅供專業(yè)人員使用。

　　二、原理

　　測試試劑1，乳膠顆粒表面包被與嗜肺軍團菌血清1群具有特異性的兔多克隆抗體。測試2-15群試劑的乳膠顆粒表面包被與嗜肺軍團菌血清2-15群特異性的多克隆兔抗體。軍團菌菌種測試試劑，乳膠顆粒表面包被與10種常規(guī)分離的軍團菌血清具有特異性的兔多克隆抗體。(參見以下表格)當乳膠顆粒與含軍團菌或者從相關的軍團菌加熱滅活的抗原的懸液混合后，發(fā)生免疫化學反應，使乳膠顆粒迅速凝集。血清1群抗體包被的乳膠顆粒只在遇到血清1群的抗原時才會發(fā)生凝集，同樣，血清2-15群抗體包被的乳膠顆粒只有在遇到血清2-15群中的任何一種抗原時，才會發(fā)生凝集。軍團菌抗體包被的乳膠顆粒與10種相關的軍團菌會發(fā)生凝集。(參見以下表格)

　　血清1群乳膠試劑與血清1群抗原的反應比血清2-15群乳膠試劑與血清2-15群抗原的反應較快較強。其原因為在生物試劑過程中2-15群抗體的混合彼此有一定的稀釋作用。軍團菌乳膠與嗜肺軍團菌血清1乳膠試劑的作用方法相同。

　　三、試劑盒組成成分

　　REAG TEST 1 1群測試試劑　HM4 軍團菌血清1群乳膠試劑　2.5mL

　　乳膠顆粒包被與嗜肺軍團菌血清1群特異性的兔多克隆抗體和鼠單克隆抗體。含0.099%的疊氮化na。(藍色瓶蓋)

　　REAG TEST 2-15 2-15群測試試劑　HM45b 軍團菌血清2-15群乳膠試劑　2.5mL

　　乳膠顆粒包被與嗜肺軍團菌血清2-15群特異性的兔多克隆抗體。含0.099%的疊氮化na防腐劑。(黃色瓶蓋)

　　 + 陽性對照試劑　HM45c　陽性對照　1.0mL

　　可與測試試劑1和2-15反應的不具活性的軍團菌的抗原，含0.099%的疊氮化na防腐劑。(黑色瓶蓋)

　　REAG TEST SPECIES 軍團菌菌種測試試劑 HM45d 軍團菌血清特殊乳膠試劑 2.5mL

　　乳膠顆粒表面包被與10種常規(guī)分離的軍團菌血清具有特異性的兔多克隆抗體。(參見以下表格)

　　含0.099%的疊氮化na防腐劑。(紅色瓶蓋)

　　NaCl 0.85% 0.85%鹽水　HM40　0.85%生理鹽水　5.0mL

　　含0.099%的疊氮化na防腐劑。(白色瓶蓋)

　　使用說明書

　　檢測板

　　攪拌棒

　　需要的其它材料

　　l 接種環(huán)

　　l 軍團菌選擇性分離培養(yǎng)基

　　l 用于煮沸處理的玻璃試管

　　l 0.85%生理鹽水

　　四、警告和注意事項

　　安全：

　　1、試劑僅供體外診斷使用。

　　2、 軍團菌乳膠凝集試劑盒作防腐劑使用的疊氮化na可與鉛或銅制品反應形成易爆的金屬疊氮化物?？捎么罅克疀_洗以避免疊氮化物的堆積。

　　3、在處理或檢測可疑致病菌時應采取適當?shù)念A防措施。被污染的物品可用3%的次氯酸鈉消毒處理30分鐘。含酸的廢液應作中和處理。

　　4、陽性對照液在生物試劑中已作惰性處理。但在使用中，依然應遵循潛在傳染性產品的處理程序。

　　檢測過程：

　　1、試劑盒應按說明書使用。

　　2、所有試劑在使用前應達到室溫。

　　3、不要稀釋試劑盒內的任何試劑。

　　4、不要混合不同批次試劑盒的試劑。

　　5、不要冷凍試劑盒內的試劑。

　　6、不要使檢測乳膠試劑的滴管接觸到陽性對照試劑或細菌樣品。

　　7、注意凝集狀態(tài)，呈凝乳狀或纖維狀可能為非真實凝集。

　　8、使用前應確保檢測板清潔干燥。

　　五、貯存及保質期

　　檢測試劑盒不使用時應貯存在2～8℃，并應在包裝盒標簽上的有效期內使用檢測試劑。

　　六、樣本

　　檢測選擇性分離平板上分離的可疑軍團菌菌落。

　　七、檢測過程

　　質量控制：

　　在每次使用檢測試劑盒前應作下列質量控制檢測，以確證試劑的有效性。

　　1、檢測試劑的控制：輕輕搖勻測試試劑(HHM4，HM45b，HM45d)，將兩種測試試劑分別滴1滴于檢測板的二個反應環(huán)內，接著在兩個反應環(huán)內各滴1滴生理鹽水(HM40)，用2支攪拌棒分別在整個區(qū)域內混勻測試液和生理鹽水，輕搖檢測板2分鐘并觀察是否會出現(xiàn)凝集。如果出現(xiàn)凝集反應，表明檢測試劑或生理鹽水受到污染，應廢棄處理。

　　2、陽性對照的控制：滴1滴陽性對照試劑(HM45c)于1個反應環(huán)內，接著在該反應環(huán)內滴1滴混勻的測試試劑1(HM4)，不要使檢測乳膠試劑的滴管接觸到陽性對照試劑。用攪拌棒在整個區(qū)域內混勻液體，輕搖檢測板2分鐘,應觀察到凝集現(xiàn)象。重復上述步驟，做測試試劑2-15(HM45b)和軍團菌菌種測試試劑(HM45d)的檢測，并應觀察到凝集現(xiàn)象。如果其中一種測試試劑未出現(xiàn)凝集反應，應采用新鮮的檢測試劑盒。

　　測試程序：

　　1、各滴1滴生理鹽水(HM40)于檢測板的3個反應環(huán)內。

　　2、用接種環(huán)從選擇性分離平板上挑取3～4個可疑軍團菌菌落，分別在2個反應環(huán)內的生理鹽水旁作涂片操作。

　　3、用攪拌棒在整個反應環(huán)內混勻生理鹽水和菌落，形成均勻的較濃菌懸液。

　　4、如果菌懸液保持均勻狀態(tài)，繼續(xù)第7步。如果菌懸液出現(xiàn)纖維狀或粒狀物(培養(yǎng)物較老或呈黏液狀時，易出現(xiàn)此種現(xiàn)象)，按下述步驟操作。

　　5、往玻璃試管中加入0.5mL的生理鹽水，從選擇性平板中挑取可疑菌落制成均勻的菌懸液。

　　6、煮沸菌懸液5分鐘，冷卻至室溫后，分別取30μL滴加在檢測板上2個反應環(huán)內。

　　7、輕輕的搖勻測試乳膠試劑(HM4,HM45b)，形成均勻的懸液。

　　8、滴1滴測試試劑1于一個反應環(huán)內的菌懸液上，滴1滴測試試劑2-15于另一個反應環(huán)內的菌懸液上。不要使檢測乳膠試劑的滴管接觸到菌懸液。

　　9、各用1支干凈的攪拌棒在整個反應環(huán)內混勻菌懸液和測試試劑。

　　10、輕搖檢測板2分鐘，并觀察凝集結果。

　　11、記錄結果后，將攪拌棒和檢測板進行適當?shù)南咎幚怼?/span>

　　八、結果說明

　　觀察凝集結果，按下表進行判斷