亚洲国产精品二区久久,日本美女后入式午夜视频在线观看,国产污视频在线观看,欧美日韩国产精品中文字幕在线观看

行業(yè)產(chǎn)品

  • 行業(yè)產(chǎn)品

上海極威生物科技有限公司


當(dāng)前位置:上海極威生物科技有限公司>技術(shù)文章>細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒說明書
技術(shù)文章

細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒說明書

閱讀:445發(fā)布時(shí)間:2016-3-18

細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一種采用經(jīng)典的碘化丙啶染色(Propidium staining,即PI staining)方法進(jìn)行細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡分析的檢測(cè)試劑盒。

  碘化丙啶(Propidium,簡(jiǎn)稱PI)是一種雙鏈DNA 的熒光染料。碘化丙啶和雙鏈DNA 結(jié)合后可以產(chǎn)生熒光,并且熒光強(qiáng)度和雙鏈DNA 的含量成正比。細(xì)胞內(nèi)的DNA 被碘化丙啶染色后,可以用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞進(jìn)行DNA 含量測(cè)定,然后根據(jù)DNA 含量的分布情況,可以進(jìn)行細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡分析。

  碘化丙啶染色后,假設(shè)G0/G1 期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1,那么含有雙份基因組DNA 的G2/M 期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度的理論值為2,正在進(jìn)行DNA 復(fù)制的S 期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1-2 之間。凋亡細(xì)胞由于細(xì)胞核發(fā)生濃縮以及發(fā)生DNA 片段化(DNA fragmentation)導(dǎo)致部分基因組DNA 片斷在染色過程中丟失,因此凋亡細(xì)胞碘化丙啶染色后呈現(xiàn)明顯的弱染,即熒光強(qiáng)度小于1,在流式檢測(cè)的熒光圖上出現(xiàn)所謂的sub-G1 峰,即凋亡細(xì)胞峰。

  細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),由于胞漿和染色質(zhì)濃縮、核碎裂,產(chǎn)生凋亡小體,使細(xì)胞的光散射性質(zhì)發(fā)生變化。在細(xì)胞凋亡的早期,細(xì)胞對(duì)前向角光散射的能力顯著降低,對(duì)側(cè)向光散射的能力增加或沒有變化。在細(xì)胞凋亡的晚期,前向和側(cè)向光散射的信號(hào)均降低。因此可通過流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞光散射的變化觀察細(xì)胞凋亡情況。

  本試劑盒通常應(yīng)用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞的細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)。如果用于組織的細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè),則必須把組織消化成單細(xì)胞狀態(tài),才可以進(jìn)行檢測(cè)。

  本試劑盒足夠檢測(cè)50 個(gè)樣品,每個(gè)樣品的細(xì)胞數(shù)量可以為10-100 萬。

包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào)   產(chǎn)品名稱             包裝

C1052-1    染色緩沖液           25ml

C1052-2  碘化丙啶染色液(20X)   1.25ml

C1052-3   RNase A(50X)          0.5ml

             說明書               1 份

保存條件:

  -20℃保存,一年有效。C1052-2 碘化丙啶染色液(20X)需避光保存。本試劑盒可4℃保存,一個(gè)月內(nèi)有效。

注意事項(xiàng):

1、本試劑盒需使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。

2、需自備PBS 和70%乙醇,PBS(C0221A)可以向極威生物訂購。

3、熒光染料均存在淬滅問題,保存和使用過程中請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。

4、碘化丙啶對(duì)人體有刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。

5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說明:

1. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:

a. 對(duì)于貼壁細(xì)胞:小心收集細(xì)胞培養(yǎng)液到一離心管內(nèi)備用。用*消化細(xì)胞,至細(xì)胞可以被輕輕用移液管或槍頭吹打下來時(shí),加入前面收集的細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下所有的貼壁細(xì)胞,并輕輕吹散細(xì)胞。再次收集到離心管內(nèi)。1000g 左右離心3-5 分鐘,沉淀細(xì)胞。對(duì)于特定的細(xì)胞,如果細(xì)胞沉淀不充分,可以適當(dāng)延長離心時(shí)間或稍稍加大離心力。小心吸除上清,可以殘留約50 微升左右的培養(yǎng)液,以避免吸走細(xì)胞。加入約1 毫升冰浴預(yù)冷的PBS,重懸細(xì)胞,并轉(zhuǎn)移到1.5 毫升離心管內(nèi)。再次離心沉淀細(xì)胞,小心吸除上清,可以殘留約50 微升左右的PBS,以避免吸走細(xì)胞。輕輕彈擊離心管底以適當(dāng)分散細(xì)胞,避免細(xì)胞成團(tuán)。

b. 對(duì)于懸浮細(xì)胞:1000g 左右離心3-5 分鐘,沉淀細(xì)胞。對(duì)于特定的細(xì)胞,如果細(xì)胞沉淀不充分,可以適當(dāng)延長離心時(shí)間或稍稍加大離心力。小心吸除上清,可以殘留約50 微升左右的培養(yǎng)液,以避免吸走細(xì)胞。加入約1 毫升冰浴預(yù)冷的PBS,重懸細(xì)胞,并轉(zhuǎn)移到1.5 毫升離心管內(nèi)。再次離心沉淀細(xì)胞,小心吸除上清,可以殘留約50 微升左右的PBS,以避免吸走細(xì)胞。輕輕彈擊離心管底以適當(dāng)分散細(xì)胞,避免細(xì)胞成團(tuán)。

2. 細(xì)胞固定:加入1 毫升冰浴預(yù)冷70%乙醇中,輕輕吹打混勻,4℃固定2 小時(shí)或更長時(shí)間。固定12-24小時(shí)可能效果更佳。1000g 左右離心3-5 分鐘,沉淀細(xì)胞。對(duì)于特定的細(xì)胞,如果細(xì)胞沉淀不充分,可以適當(dāng)延長離心時(shí)間或稍稍加大離心力。小心吸除上清,可以殘留約50 微升左右的70%乙醇,以避免吸走細(xì)胞。加入約1 毫升冰浴預(yù)冷的PBS,重懸細(xì)胞。再次離心沉淀細(xì)胞,小心吸除上清,可以殘留約50 微升左右的PBS,以避免吸走細(xì)胞。輕輕彈擊離心管底以適當(dāng)分散細(xì)胞,避免細(xì)胞成團(tuán)。

3. 碘化丙啶染色液的配制:參考下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品的數(shù)量配制適量的碘化丙啶染色液:

                 1 個(gè)樣品   6 個(gè)樣品   12 個(gè)樣品

染色緩沖液         0.5ml       3ml       6ml

碘化丙啶染色液(20X) 25μl     150μl    300μl

RNase A(50X)        10μl      60μl    120μl

Final volume       0.535ml     3.21ml   6.42ml

    注:配制好的碘化丙啶染色液短時(shí)間內(nèi)可以4℃保存,宜當(dāng)日使用。

4. 染色:每管細(xì)胞樣品中加入0.5 毫升碘化丙啶染色液,緩慢并充分重懸細(xì)胞沉淀,37℃避光溫浴30 分鐘。隨后可以4℃或冰浴避光存放。染色完成后宜在24 小時(shí)內(nèi)完成流式檢測(cè),能在當(dāng)日完成流式檢測(cè)。

5. 流式檢測(cè)和分析:用流式細(xì)胞儀在激發(fā)波長488nm 波長處檢測(cè)紅色熒光,同時(shí)檢測(cè)光散射情況。采用適當(dāng)分析軟件進(jìn)行細(xì)胞DNA 含量分析和光散射分析。


環(huán)保在線 設(shè)計(jì)制作,未經(jīng)允許翻錄必究 .? ? ? Copyright(C)?2021 http://www.kytsldc.cn,All rights reserved.

以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),環(huán)保在線對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。 溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

請(qǐng) 登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
精品一区二区三区成人免费视频| 爱爱视频小抽插动漫| 久久久久久国产A免费观看| 欧美大鸡巴操穴日韩| 日本潘金莲三级bd高清| 男人透女人视频短篇| 大狼狗插阴道视频| 骚女性爱视频在线看| 亚洲天堂成年人在线视频| 色逼色逼色逼色逼色逼色| 国产污污污在线观看视频| 国产午夜福利视频第三区| 美女操逼视频app| 在线精品亚洲观看不卡欧| 国产欧美一区二区精品久久久| 亚洲精品国产人久久| 久久99热精品在线观看| 香蕉国产精品偷在线| 下载风骚美女想吃大机吧| 伊人久久久久久久久香港| 亚洲av伦理一区二区三区久久| 久久久精品日韩一区二区三区| 精品人妻少妇一区二区三区不卡| 男生的小鸡鸡插进女生的桃子 里| 国产乱子伦视频一区二区三区| 开心五月播五月亚洲第一| 大鸡巴插入阴道视频| 中文字幕在线精品的视频| 使劲操我小穴视频| 男人操女人下面国产剧情| 18岁以下禁看美女的胸| 最新的精品亚洲一区二区| 女人被男人操到高潮视频| 青青操成人版性视频| 一色道久久88加勒比一| 国产三级精品久久久久| 国产蜜月精品高清一区二区三区| 91孕妇精品一区二区三区| 女人的骚逼免费视频| 亚洲乱熟女一区二区三区| 久久久中文字幕在线视频|