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更新時(shí)間:2019-07-12 12:10:29瀏覽次數(shù):145次
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【原理介紹】犬白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒。在免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)過程中起中心作用。類風(fēng)濕、結(jié)腸炎等病癥也和IL-1β的產(chǎn)生過多有關(guān)。IL-1α和IL-1β有25%的同源性。
犬白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒,英文名稱:Canine IL-1β ELISA Kit
【原理介紹】IL-1β,白介素1β。在免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)過程中起中心作用。類風(fēng)濕、結(jié)腸炎等病癥也和IL-1β的產(chǎn)生過多有關(guān)。IL-1α和IL-1β有25%的同源性。合成IL-1β的細(xì)胞很廣泛,包括單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、星形細(xì)胞、NK細(xì)胞、角化細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等。兩者合成時(shí)都是31KDa的前體,經(jīng)剪切后成為17.4KDa的成熟蛋白質(zhì)。IL-1β前體在細(xì)胞內(nèi)合成,并無生物學(xué)活性。
國內(nèi)統(tǒng)一規(guī)格:48T/96T
保質(zhì)期:六個(gè)月
品牌:國內(nèi)外ELISA試劑盒品牌
運(yùn)輸:包郵(中國大陸)
犬白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒包裝形式:盒裝(液體盒裝)
ELISA實(shí)驗(yàn)操作步驟的一般常見方法
方法一)用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1)包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2)加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3)加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4)加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5)終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6)犬白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。
方法二)用于檢測未知抗體的間接法:犬白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。犬白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒
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