ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，RANA Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，RANA Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測(cè)區(qū)域。

RANA Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過(guò)程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。RANA Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，RANA Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，RANA Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。

脂類物質(zhì)無(wú)法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開(kāi)蓋置冰箱過(guò)夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

RANA Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyA329Hu    人多功能肽酶2(LMP2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA545Hu    *E(IgE)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Immunoglobulin E (IgE)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA355Hu    人甲狀腺球蛋白(TG)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Thyroglobulin (TG)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA356Hu    人組蛋白H2B(H2B)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Histone H2B (H2B)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA362Hu    人尾加壓素2(UST2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Urotensin 2 (UST2)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA363Hu    人血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Plaet/Endothelial HZll Adhesion Molecule (PECAM1)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA365Hu    人和肽素(CPP)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Copeptin (CPP)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA402Hu    人基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA403Hu    人粘蛋白17(MUC17)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Mucin 17 (MUC17)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA408Hu    人*9(KLK9)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Kallikrein 9 (KLK9)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA410Hu    人GATA結(jié)合蛋白3(GATA3)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for GATA Binding Protein 3 (GATA3)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA411Hu    人鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA412Hu    人α-血紅蛋白穩(wěn)定蛋白(αHSP)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Alpha-Hemoglobin Stabilizing Protein (aHSP)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA413Hu    人粘蛋白1(MUC1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Mucin 1 (MUC1)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA414Hu    人性別決定區(qū)Y框蛋白18(SOX18)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Sex Determining Region Y Box Protein 18 (SOX18)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA415Hu    人彈性蛋白微原纖維界面因子1(EMILIN1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Elastin Microfibril InterfaHZ Located Protein 1 (EMILIN1)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA416Hu    人早期生長(zhǎng)應(yīng)答因子1(EGR1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Early Growth Response Protein 1 (EGR1)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA421Hu    人髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(MOG)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA422Hu    人髓鞘關(guān)聯(lián)糖蛋白(MAG)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Myelin Associated Glycoprotein (MAG)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA427Hu    人生長(zhǎng)分化因子9(GDF9)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 9 (GDF9)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA441Hu    人黃體激素(LH)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Luteinizing Hormone (LH)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA447Hu    人C-肽(C-Peptide)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for C-Peptide    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA448Hu    人胰島素(INS)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Insulin (INS)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml