ELSIA操作步驟復雜，影響反應因素較多，PYD Elisa kit特別是固相載體的包被難達到各個體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線。測定大分子量物質的夾心法ELISA，標準曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，PYD Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。

PYD Elisa kit技術操作要點：

1. 標本的采取和保存。
2. 試劑的準備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標比色儀。
8. 結果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結合到固相載體表面的過程。PYD Elisa kit蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯(lián)結多發(fā)生在Fc段上，抗體結合點暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，PYD Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體作預包被，其后通過抗原抗體反應使抗原固相化。此間接結合在固相上的抗原遠離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質，如聚賴氨酸、*等作預包被，也可提高核酸的結合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，PYD Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應用于各種抗原物質的定量測定。

脂類物質無法與固相載體結合，可將其在有機溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質自然干固在固相表面?？剐牧字贵w的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

PYD Elisa kit相關產(chǎn)品*：xyB985Hu    人上皮型脂肪酸結合蛋白(FABP5)檢測試劑盒    ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 5, Epidermal (FABP5)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB986Hu    人血紅素結合蛋白(HPX)檢測試劑盒    ELISA Kit for Hemopexin (HPX)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB872Hu    人CD3d分子(CD3d)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 3d (CD3d)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB988Hu    人Toll樣受體1(TLR1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Toll Like ReHZptor 1 (TLR1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB989Hu    人Toll樣受體3(TLR3)檢測試劑盒    ELISA Kit for Toll Like ReHZptor 3 (TLR3)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB990Hu    人Toll樣受體5(TLR5)檢測試劑盒    ELISA Kit for Toll Like ReHZptor 5 (TLR5)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB991Hu    人Toll樣受體8(TLR8)檢測試劑盒    ELISA Kit for Toll Like ReHZptor 8 (TLR8)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB992Hu    人Toll樣受體10(TLR10)檢測試劑盒    ELISA Kit for Toll Like ReHZptor 10 (TLR10)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB994Hu    人抑制蛋白β2(ARRβ2)檢測試劑盒    ELISA Kit for Arrestin Beta 2 (ARRb2)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB996Hu    人載脂蛋白C2(APOC2)檢測試劑盒    ELISA Kit for Apolipoprotein C2 (APOC2)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB997Hu    人載脂蛋白A5(APOA5)檢測試劑盒    ELISA Kit for Apolipoprotein A5 (APOA5)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB998Hu    人KSP鈣黏蛋白(CDH16)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cadherin 16 (CDH16)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC000Hu    人觸珠蛋白相關蛋白(HPR)檢測試劑盒    ELISA Kit for Haptoglobin Related Protein (HPR)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC002Hu    人肝腸鈣黏蛋白(CDH17)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cadherin 17 (CDH17)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC008Hu    人白介素35(IL35)檢測試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 35 (IL35)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC017Hu    人Ⅱ型前膠原(PCⅡ)檢測試劑盒    ELISA Kit for Procollagen II (PCII)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC032Hu    人白介素22(IL22)檢測試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 22 (IL22)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC033Hu    人熱休克蛋白β8(HSPβ8)檢測試劑盒    ELISA Kit for Heat Shock Protein Beta 8 (HSPb8)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC023Hu    人葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)檢測試劑盒    ELISA Kit for Glucose Transporter 4 (GLUT4)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC024Hu    人線粒體乙醛脫氫酶(ALDM)檢測試劑盒    ELISA Kit for Aldehyde Dehydrogenase, Mitochondrial (ALDM)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC025Hu    人角蛋白8(KRT8)檢測試劑盒    ELISA Kit for Keratin 8 (KRT8)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC034Hu    人生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒    ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml