ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，HSL Elisa試劑盒特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，HSL Elisa試劑盒中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。

HSL Elisa試劑盒技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。HSL Elisa試劑盒蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，HSL Elisa試劑盒直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，HSL Elisa試劑盒即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面?？剐牧字贵w的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

HSL Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品*：xyB003Ge    雌酮(E1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Estrone (E1)    檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyK510Ge    *(EE)檢測試劑盒    ELISA Kit for Ethinylestradiol (EE)     檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA455Ge    雌三醇(E3)檢測試劑盒    ELISA Kit for Estriol (E3)    檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA461Ge    雌二醇(E2)檢測試劑盒    ELISA Kit for Estradiol (E2)    檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyC037Ge    三磷酸肌醇(IP3)檢測試劑盒    ELISA Kit for Inositol Triphosphate (IP3)     檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA349Ge    三磷酸腺苷(ATP)檢測試劑盒    ELISA Kit for Adenosine Triphosphate (ATP)     檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA240Ge    雄烯二醇(AED)檢測試劑盒    ELISA Kit for Androstenediol (AED)    檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA456Ge    雄烯二酮(ASD)檢測試劑盒    ELISA Kit for Androstenedione (ASD)    檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA070Ge    雄甾酮(ADT)檢測試劑盒    ELISA Kit for Androsterone (ADT)     檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA540Ge    皮質(zhì)酮(CORT)檢測試劑盒    ELISA Kit for Corticosterone (CORT)     檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA462Ge    *(Cor)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cortisol (Cor)     檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyB001Ge    11-去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)檢測試劑盒    ELISA Kit for 11-Dehydrothromboxane B2 (11-DH-TXB2)    檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyB841Ge    去氨*加壓素(DDAVP)檢測試劑盒    ELISA Kit for 1-Desamino 8D Arginine Vasopressin (DDAVP)    檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA907Ge    *(NE)檢測試劑盒    ELISA Kit for Noradrenaline (NE)    檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA186Ge    游離三碘甲狀腺原氨酸(fT3)檢測試劑盒    ELISA Kit for Free Triiodothyronine (fT3)     檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA185Ge    游離甲狀腺素(fT4)檢測試劑盒    ELISA Kit for Free Thyroxine (fT4)     檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA460Ge    表睪酮(ET)檢測試劑盒    ELISA Kit for Epitestosterone (ET)    檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA911Ge    醛固酮(ALD)檢測試劑盒    ELISA Kit for Aldosterone (ALD)    檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyB701Ge    *(CH)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cholesterol (CH)     檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA459Ge    孕酮(Pg)檢測試劑盒    ELISA Kit for Progesterone (Pg)     檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA191Ge    硫酸雌酮(E1S)檢測試劑盒    ELISA Kit for Estrone Sulfate (E1S)     檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyA458Ge    睪酮(T)檢測試劑盒    ELISA Kit for Testosterone (T)     檢測范圍：21.592-1000pg/ml    
xyB963Ge    別孕烯醇酮(AP)檢測試劑盒    ELISA Kit for Allopregnanolone (AP)     檢測范圍：21.592-1000pg/ml