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上海一研生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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細(xì)胞培養(yǎng)
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細(xì)胞專用培養(yǎng)基操作步驟

時(shí)間:2025/2/27閱讀:154
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     細(xì)胞專用培養(yǎng)基操作步驟完成后,接下來的關(guān)鍵步驟是確保無菌操作環(huán)境下的細(xì)胞接種與培養(yǎng)。首先,將準(zhǔn)備好的細(xì)胞懸液輕輕搖勻,使用移液槍吸取適量細(xì)胞懸液,避免產(chǎn)生氣泡,以免影響細(xì)胞分布均勻性。在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好后,緩緩將細(xì)胞懸液滴加到已含有適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中,注意動(dòng)作輕柔,以免對(duì)細(xì)胞造成機(jī)械損傷。

    接種完成后,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)容器,使細(xì)胞均勻分散于培養(yǎng)基中。隨后,將培養(yǎng)容器轉(zhuǎn)移至設(shè)定好適宜溫度、濕度及氣體成分(通常為37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱)的培養(yǎng)箱中。在此階段,定期觀察細(xì)胞生長情況至關(guān)重要,可通過顯微鏡監(jiān)測細(xì)胞形態(tài)、密度及是否有污染跡象。

    根據(jù)細(xì)胞類型的不同,適時(shí)進(jìn)行換液操作,以去除代謝產(chǎn)物,補(bǔ)充新鮮營養(yǎng),維持細(xì)胞健康生長。換液時(shí),同樣需嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作原則,使用無菌吸管吸去舊培養(yǎng)基,再沿容器壁緩慢加入預(yù)熱至室溫的新培養(yǎng)基,避免直接沖擊細(xì)胞層。

    當(dāng)細(xì)胞達(dá)到預(yù)定的生長狀態(tài)或密度時(shí),即可進(jìn)行后續(xù)的細(xì)胞傳代、凍存或用于實(shí)驗(yàn)研究。整個(gè)操作過程中,詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)記錄包括培養(yǎng)基成分、操作時(shí)間、細(xì)胞生長狀態(tài)等,以便追溯與分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果,確保科研數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。



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