酶聯(lián)免疫吸附測定雙抗體夾心法操作步驟

時(shí)間：2017/4/1閱讀：1169

巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法，操作步驟如下:

(1)將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體:洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。

(2)用脫脂奶粉或BSA進(jìn)行封閉。洗滌除去多余的脫脂奶粉或BSA。

(3)加受檢標(biāo)本:使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時(shí)間，巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合，形成固相抗原復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。

(4)加酶標(biāo)抗體:使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān)。

(5)加底物:夾心式復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量。

巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒根據(jù)同樣原理，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物，即可用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中的抗體。

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