商品詳情：
生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)方案A（默認）

生長培養(yǎng)基:

MEM（ATCC改良）＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2-3次/周

注意事項 該細胞貼壁松散，操作時請盡量輕柔；換液時需預熱培養(yǎng)基；收貨如有大塊脫落的細胞團，為正?，F(xiàn)象，請按照收貨注意事項處理。

參考資料(來源文獻)

背景描述 293 [HEK-293]細胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細胞形成的永生化細胞，293 [HEK-293]細胞包含并表達轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報道中指出，293 [HEK-293]細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA，但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點的克隆測序發(fā)現(xiàn)，Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細胞19號染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主，可表達異常的玻連蛋白的細胞表面受體，由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。

年齡（性別） 胎兒

組織來源 腎；以腺病毒5DNA進行轉(zhuǎn)化

細胞類型 轉(zhuǎn)化細胞系

生物安全等級 BSL-2

倍增時間 ~24-30 hours

致瘤性 Yes, forms tumors in nude mice.

受體表達情況 vitronectin

保藏機構(gòu) ATCC; CRL-1573 ATCC： PTA-4488 DSMZ： ACC-305 ECACC： 85120602

商品屬性：

細胞系培養(yǎng)步驟：

細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。

細胞復蘇?：

將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。

將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細胞傳代?：

當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。

加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入適量DME培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。

加入行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。

這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學研究提供了大量的細胞樣本?。

?細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。

細胞復蘇?：

將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。

將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細胞傳代?：

當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。

加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

細胞凍存?：

當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。

加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。

這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學研究提供了大量的細胞樣本?

公司正在出售的產(chǎn)品：

細胞接收后的處理：

1）HEK-293A人胚腎細胞收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。                      

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備MEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。